自然杀伤细胞活性临床意义.docx

自然杀伤细胞活性临床意义自然杀伤细胞活性临床意义K细胞主要分布在腹腔渗出液，外周血、脾脏中;NK细胞主要分布在骨髓、外周血和脾脏中。临床主要用于肿瘤、病毒感染、寄生虫感染、自身免疫和移植免疫等病人，检测其K、NK细胞杀伤功能，在维持和调节特异性免疫中起重要作用。自然杀伤细胞活性注意事项：(1)要求效/靶细胞比为100∶1，若比>100∶1，自然杀伤率不呈对数增加。且标本用量亦大。(2)标记靶细胞放置时间不宜过久。因随时间延长死细胞增加，自然释放率欠准确。(3)标记的125IUdR浓度要合适，要求125IUdR的放射性浓度为1.11×107Bq/ml，如浓度过低，标记率自然杀伤细胞活性检查过程：（1）效靶细胞作用：将分离好的淋巴细胞悬液（效应细胞）和标记的K562细胞（靶细胞）按100∶1的比例加入平底塑料试管中，按表1操作，同时设自然释放管（作为对照管），每个标本作了3个复管，最后用培养液使每管增至1ml，1500r/min离心，促进效靶细胞结合，置37℃、5%CO2孵箱内孵育18h。（2）酶促反应：取出孵育试管，弃去各管上清液，剩下的`细胞加一定浓度（2.2g/L）胰蛋白酶和DNA酶各0.1m1，混匀后37℃水浴30min，促使被攻击的靶细胞释放125IUdR，随后各管立即加入0.8mlHank液终止酶促反应。混匀后1500r/min离心2min。（3）测放射强度和计算：用γ型计数器分别测各管（上清和细胞管）cpm值，按下式计算；自然杀伤细胞活性不适宜人群：造血功能减低的人如白血病、各种贫血、骨髓增生异常综合症等患者或血小板减少的人抽血时应注意，不宜多抽或频繁抽血。自然杀伤细胞活性不良反应与风险：1.抽血结束后，不要按揉针孔部位，以免造成皮下血肿。如果抽血处有小片青淤，轻微触痛，请不要慌张，可过24小时后再做热敷，以促进淤血吸收。一般的小量淤血会在3到5天的时候内逐渐吸收而颜色变浅，恢复正常。2.抽血后出现晕血症状如：头晕、眼花、乏力等应立即平卧、饮少量糖水，待症状缓解后再进行体检。