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基因工程操作流程为什么RNA聚合酶能够仅在启动子处结合呢?启动子处的核苷酸顺序具有特异的形状以便与RNA聚合酶结合，就好像酶与其底物的结构相恰恰适合一样。将100个以上启动子的顺序进行了比较，发现在RNA合成开始位点的上游大约10bp和35bp处有两个共同的顺序，称为-10和-35序列。这两个序列的共同顺序如下，-35区“AATGTGTGGAAT”，-10区“TTGACATATATT”。大多数启动子均有共同顺序（consensussequence)，只有少数几个核苷酸的差别。终止子能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质检测目的基因是否转录出了mRNA将含有某种生物的不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。3）将目的基因导入微生物细胞目的基因的获取：三种方法原核细胞与真核细胞的基因结构比较检测目的基因是否插入了转基因生物的染色体DNA上(1)从基因文库中获取——多聚酶链式反应获取目的基因的方法一：从基因文库中获取目的基因常用方法：---农杆菌转化法基因中内含子（位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段）检测方法：分子杂交技术基因工程的基本操作程序是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。基因组文库：含有一种生物所有的基因能转录相应的信使RNA，能编码蛋白质上述三个步骤为一个循环，经25～30次循1.2基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序目的基因——主要指编码蛋白质的结构基因,也可以是一些具有调控作用的因子。组织或细胞染色体DNAmRNA文库类型PCR(polymerasechainreaction)——多聚酶链式反应原理：DNA双链复制利用PCR技术扩增目的基因检测方法：分子杂交技术变性：将反应系统加热至90℃-95℃，使模板DNA完全变性成为单链；用Ca+（常用CaCl2）处理细菌细胞，以增大细胞壁的通透性，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态——感受态细胞。3）将目的基因导入微生物细胞适用于目的基因不是很大且其序列是已知的不能够编码蛋白质的序列叫做内含子1）将目的基因导入植物细胞存在于转化细菌内，由载体所携带的所有基因组DNA的集合。⑤用重组质粒转化大肠杆菌③分离大肠杆菌中的质粒3）将目的基因导入微生物细胞是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。小结:基因表达载体的组成常用的受体细胞1）将目的基因导入植物细胞1）将目的基因导入植物细胞1）将目的基因导入植物细胞2）将目的基因导入动物细胞3）将目的基因导入微生物细胞1)分子水平的检测DNA分子杂交技术感谢观看