注射型透明质酸水凝胶的制备方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN104140541104140541A(43)申请公布日2014.11.12(21)申请号201310170708.7C08K5/37(2006.01)(22)申请日2013.05.10C08B37/08(2006.01)(71)申请人北京化工大学地址100029北京市朝阳区北三环东路北京化工大学综合楼510室(72)发明人张建军李瑞端张晶晶尼尔·福斯特(74)专利代理机构北京正理专利代理有限公司11257代理人张文祎(51)Int.Cl.C08J3/075(2006.01)C08J3/24(2006.01)C08L5/08(2006.01)权权利要求书2页利要求书2页说明书6页说明书6页附图4页附图4页(54)发明名称注射型透明质酸水凝胶的制备方法及其应用(57)摘要本发明公开了一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，包括如下步骤：通过1-乙基-3-(3-二甲氨基)碳二亚胺盐酸盐引发己二酸二酰肼的氨基与HA的主链羧基的缩合反应，得到主链具有氨基的透明质酸-己二酸二酰肼衍生物，然后将N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺与HA-ADH的氨基反应得到丙烯酸酯官能化透明质酸衍生物；丙烯酸酯官能化透明质酸衍生物与双巯基交联剂进行交联，形成注射型透明质酸水凝胶。本发明丙烯酸酯基功能化的HA-AC合成方法简单易行，适合于工业化放大生产；迈克尔加成反应的环境友好性、生物惰性和反应速度可控性，为其在注射型水凝胶的应用中奠定了良好的基础；与物理缔合注射型凝胶相比，HA-AC化学交联水凝胶凝胶具有优良的稳定性和机械性能。CN104140541ACN1045ACN104140541A权利要求书1/2页1.一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：通过1-乙基-3-(3-二甲氨基)碳二亚胺盐酸盐引发己二酸二酰肼的氨基与HA的主链羧基的缩合反应，得到主链具有氨基的透明质酸-己二酸二酰肼衍生物，然后将N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺与HA-ADH的氨基反应得到丙烯酸酯官能化透明质酸衍生物；丙烯酸酯官能化透明质酸衍生物与双巯基交联剂进行交联，形成注射型透明质酸水凝胶。2.根据权利要求1所述的一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下具体步骤：1）透明质酸-己二酸二酰肼衍生物的制备将一定量的HA溶解在去离子水中配置成0.3%-2%的水溶液，然后在水溶液中加入8-25倍HA重量的己二酸二酰肼并通过NaOH和HCl调整溶液pH值到5.0-7.4，再加入1-4倍HA重量的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺，引发反应≥12小时；反应溶液经过透析提纯后冻干保存；2）丙烯酸酯基功能化的透明质酸衍生物的制备取一定量的HA-ADH溶解于pH=7.4-8.5的缓冲溶液中配置成0.55-1.1%的溶液,另取0.5-1.5倍HA-ADH重量的N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺溶解于二甲基亚砜中；然后将NAS溶液加入到HA-ADH溶液中，室温搅拌≥12小时，最后将反应溶液透析提纯，再进一步冻干得到产物HA-AC；3）水凝胶的制备将HA-AC与双巯基交联剂加入到缓冲溶液混合均匀，得到混合溶液，将混合溶液升温至37-50℃交联形成注射型透明质酸水凝胶。3.根据权利要求2中所述一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，其特征在于：优选地，步骤1）中，所述透析提纯使用截留分子量8-10kDa的透析袋；优选地，步骤1）中，HA水溶液的重量百分浓度为0.5-1%；更优选地，HA水溶液的重量百分浓度为0.5%；优选地，步骤1）中，所述己二酸二酰肼与HA的重量比为10-15:1；更优选地，所述己二酸二酰肼与HA的重量比为10:1；优选地，步骤1）中，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺与HA的重量比为1-3:1。更优选地，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺与HA的重量比为2:1；优选地，步骤1）中，所述HA的分子量为60-200KDa。4.根据权利要求2中所述一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，其特征在于：优选地，步骤2）中，所述HA-ADH的缓冲溶液是磷酸溶液；优选地，步骤2）中，所述NAS与HA-ADH的重量比为0.5-1:1；更优选地，所述NAS与HA-ADH的重量比为0.7:1；优选地，步骤2）中，所述透析提纯使用截留分子量8-10kDa的透析袋。5.根据权利要求2中所述一种注射型透明质酸水凝胶的制备方法，其特征在于：优选地，步骤3）中，所述缓冲溶液为磷酸溶液；优选地，步骤3）中，所述混合溶液中HA-AC的质量百分比溶度为6-20%；优选地，步骤3）中，HA-AC与双巯基交联剂的摩尔比为1:0.5-1.2；优选地，步骤3）中，所述双巯基交联剂选自下列物质中的一种：双巯