多肽-白蛋白偶联药物、其制备方法及应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105440112A(43)申请公布日2016.03.30(21)申请号201510888526.2A61P35/00(2006.01)(22)申请日2015.12.07(71)申请人国家纳米科学中心地址100080北京市海淀区中关村北一条11号(72)发明人王琛侯静菲杨延莲于越(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人李相雨(51)Int.Cl.C07K14/00(2006.01)C07K14/76(2006.01)C07K1/34(2006.01)C07K1/02(2006.01)A61K31/337(2006.01)权利要求书1页说明书9页A61K47/48(2006.01)序列表1页附图4页(54)发明名称多肽-白蛋白偶联药物、其制备方法及应用(57)摘要本发明提供一种用于癌症治疗的多肽-白蛋白偶联药物。所述多肽能够特异性结合上皮细胞粘附分子(Epithelialcelladhesionmolecule，EpCAM)，其末端修饰的3-马来酰亚胺基团(BMPA)可与人血清白蛋白的游离半胱氨酸发生迈克尔加成反应；所述多肽-白蛋白偶联药物由白蛋白结合型化疗药物与多肽通过化学偶联形成，优选地，白蛋白结合型化疗药物为白蛋白结合型紫杉醇(Abraxane)。本发明的多肽-白蛋白偶联药物具有较强的特异性，对癌变细胞有极强的杀伤力，为癌症的靶向治疗提供可行的方法和技术手段，在肿瘤的靶向治疗中具有重要价值。CN105440112ACN105440112A权利要求书1/1页1.特异性结合上皮细胞粘附分子的多肽PepB，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为VRRDAPRFSMQGLDACGGNCNK，且在多肽的C末端修饰有马来酰亚胺基团。2.多肽-白蛋白偶联药物，其特征在于，其是将权利要求1所述多肽PepB与白蛋白结合型化疗药物通过化学偶联形成的多肽-白蛋白偶联药物。3.根据权利要求2所述的多肽-白蛋白偶联药物，其特征在于，所述白蛋白结合型化疗药物为白蛋白结合型紫杉醇。4.权利要求3所述多肽-白蛋白偶联药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)分别配制白蛋白结合型紫杉醇溶液和多肽PepB溶液；2)将配制好的白蛋白结合型紫杉醇溶液和多肽PepB溶液混匀，摇床孵育，即得多肽-白蛋白偶联药物溶液；3)将上述药物溶液进行超滤脱盐后，冷冻干燥，即得多肽-白蛋白偶联药物粉末。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤1)中用PBS缓冲液溶解多肽PepB配制成浓度0.3-9mg/mL的多肽PepB溶液；用生理盐水溶解白蛋白结合型紫杉醇药物粉末，配制成一定浓度的母液，再用PBS缓冲液稀释成浓度0.7-20mg/mL的白蛋白结合型紫杉醇溶液。6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，多肽PepB与白蛋白结合型紫杉醇中所含人血清白蛋白的摩尔比为10-1:1，优选为10:1、5:1、2:1、1:1。7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)中孵育温度为20～40℃，孵育时间为2～12h。8.根据权利要求1-7任一项所述的，其特征在于，步骤3)中用0.22μm滤膜进行超滤。9.权利要求2或3所述的多肽-白蛋白偶联药物在制备肿瘤靶向性治疗药物中的应用。10.权利要求2或3所述的多肽-白蛋白偶联药物在制备高表达上皮细胞粘附分子的相关肿瘤靶向药物中的应用，所述肿瘤包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胰腺癌、直肠癌、胃癌，优选乳腺癌。2CN105440112A说明书1/9页多肽-白蛋白偶联药物、其制备方法及应用技术领域[0001]本发明属于生物医药技术领域，具体地说，涉及一种多肽-白蛋白偶联药物、其制备方法及应用。背景技术[0002]肿瘤是严重危害人类身体健康的疾病之一，我国的肿瘤发病率和死亡率逐年增高。肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤两大类，而上皮来源的恶性肿瘤又称为癌。在我国，平均每天有将近8500人被确诊为癌症，每分钟就有6人被诊断为癌症，每7到8人中就有1人死于癌症。全国恶性肿瘤发病率前三位是肺癌、乳腺癌和胃癌。统计显示，近两年来，女性癌症发病率上升明显，尤其是位居女性恶性肿瘤第一位的乳腺癌，每年新发约21万病例。我国的癌症发病率接近世界水平，但死亡率高于世界水平，持续上升的恶性肿瘤发病率，已成为一个必须高度重视的公共卫生问题乃至社会问题。[0003]白蛋白结合型紫杉醇(Abraxane)是应用白蛋白纳米技术构建的靶向化疗药物，是FDA批准的用于治疗联合化疗失败的转移性乳腺癌或辅助化疗后6个月内复发乳腺癌的临床用药，包括紫杉醇Paclitaxel和人血清白蛋白(HumanSerumAlbumin，HSA)。紫杉醇Paclitaxel是Abraxane药物的活性成分，它