探针及引物组合物.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108085419A(43)申请公布日2018.05.29(21)申请号201711470270.9(22)申请日2017.12.29(71)申请人迈克生物股份有限公司地址611731四川省成都市高新区百川路16号(72)发明人文春描杨文秀杨丽龙腾镶(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/6886(2018.01)C12Q1/686(2018.01)C12N15/11(2006.01)C12R1/93(2006.01)权利要求书2页说明书15页序列表12页附图9页(54)发明名称探针及引物组合物(57)摘要本发明涉及分子生物学及医学检验和体外诊断领域。具体而言，本发明提供了一种探针及引物组合物，及其用于检测人乳头瘤病毒及相关病症的试剂盒。本发明的试剂盒具有显著提高的灵敏度和高度特异性，达到了降低漏检率和排除假阳性的效果，在体外检测及临床领域具有很高的应用价值。CN108085419ACN108085419A权利要求书1/2页1.一种探针及引物组合物，其包含如下组分：(1)包含13种探针的第一探针组及包含24种引物的第一引物组，其中所述13种探针分别具有如SEQIDNo：1-13所示的核苷酸序列，所述24种引物分别具有如SEQIDNo：14-37所示的核苷酸序列；(2)包含1种探针的第二探针组及包含2种引物的第二引物组，其中所述1种探针具有如SEQIDNo：38所示的核苷酸序列，所述2种引物分别具有如SEQIDNo：39-40所示的核苷酸序列；(3)包含1种探针的第三探针组及包含2种引物的第三引物组，其中所述1种探针具有如SEQIDNo：41所示的核苷酸序列，所述2种引物分别具有如SEQIDNo：42-43所示的核苷酸序列；及任选的(4)包含1种探针的第四探针组及包含2种引物的第四引物组，其中所述1种探针具有如SEQIDNo：44所示的核苷酸序列，所述2种引物分别具有如SEQIDNo：45-46所示的核苷酸序列。2.如权利要求1所述的探针及引物组合物，其中所述组分(1)-(4)中所述探针带有标记物；更优选地，所述标记物为荧光标记物。3.如权利要求2所述的探针及引物组合物，其中所述第一、第二、第三和第四探针组的荧光标记物分别是不同的。4.如权利要求1-3任一项所述的探针及引物组合物，其中所述探针及引物组合物用于检测人乳头状瘤病毒。5.一种人乳头状瘤病毒(HPV)检测试剂盒，其包含如下组分：(1)第一检测组，其包含分别针对HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针分别具有如SEQIDNo：1-13所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：14-37所示的核苷酸序列；(2)第二检测组，其包含针对HPV16型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针具有如SEQIDNo：38所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：39-40所示的核苷酸序列；(3)第三检测组，其包含针对HPV18型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针具有如SEQIDNo：41所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：42-43所示的核苷酸序列；及任选的(4)第四检测组，其包含针对β-球蛋白基因的探针及引物，其中所述探针具有如SEQIDNo：44所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：45-46所示的核苷酸序列。6.如权利要求5所述的检测试剂盒，其中所述组分(1)-(4)中所述探针带有标记物。7.如权利要求5或6所述的检测试剂盒，其中所述检测包含如下步骤：(1)从受试者获得生物样品，(2)用权利要求5或6所述的试剂盒测定所述生物样品中是否存在人乳头状瘤病毒DNA。8.一种用于评价受试者罹患宫颈癌的风险的试剂盒，其包含如下组分：(1)第一检测组，其包含分别针对HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针分别具2CN108085419A权利要求书2/2页有如SEQIDNo：1-13所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：14-37所示的核苷酸序列；(2)第二检测组，其包含针对HPV16型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针具有如SEQIDNo：38所示的核苷酸序列，所述引物分别具有如SEQIDNo：39-40所示的核苷酸序列；(3)第三检测组，其包含针对HPV18型人乳头状瘤病毒的探针及引物，其中所述探针具有如SEQIDNo：41所示