抗Desmin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109485724A(43)申请公布日2019.03.19(21)申请号201811364724.9C12N5/20(2006.01)(22)申请日2018.11.16G01N33/68(2006.01)G01N33/577(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/91(2006.01)CGMCCNo.162052018.07.30(71)申请人福州迈新生物技术开发有限公司地址350108福建省福州市闽侯县科技东路3号福州高新区海西高新技术产业园创新园12号楼(72)发明人李恢波彭永辉吴茂王小亚陈惠玲(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人林祥翔黄以琳(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书6页C07K16/18(2006.01)序列表3页附图3页(54)发明名称抗Desmin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗Desmin蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的氨基酸序列。发明人还提供了抗Desmin蛋白单克隆抗体的制备方法，制备该抗体的抗原为一段优选的、由大肠杆菌表达、具有免疫原性活性的重组蛋白。发明人还提供了一株分泌抗Desmin蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系14G1C12，保藏号为：CGMCCNO.16205。抗Desmin蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达Desmin蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。CN109485724ACN109485724A权利要求书1/1页1.一种抗Desmin蛋白单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的核苷酸序列所编码。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别Desmin蛋白。4.根据权利要求3所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别Desmin蛋白α螺旋杆状区第109位至第412位氨基酸片段。5.一种抗Desmin蛋白单克隆抗体，由保藏号为CGMCCNO.16205的杂交瘤细胞系产生。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述抗Desmin蛋白为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。7.一种抗Desmin蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于:选取Desmin蛋白α螺旋杆状区第109位至第412位氨基酸片段作为免疫原并进行蛋白重组，所述重组蛋白经由大肠杆菌重组表达。8.一株分泌抗Desmin蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系14G1C12，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNO.16205。9.权利要求1-6任一所述的抗Desmin蛋白单克隆抗体，在免疫检测中的用途。10.根据权利要求9所述的免疫检测，其特征在于，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。2CN109485724A说明书1/6页抗Desmin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗Desmin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。背景技术[0002]结蛋白(Desmin,也称肌间线蛋白)是一种分子量为50-55kDa的肌肉组织中间丝位于胞浆的蛋白,由470个氨基酸构成，其两端呈球形，中间呈杆状，主要以α螺旋构成细胞骨架结构，其中杆状区又分成1A、1B、2A和2B四个结构域。成熟的结蛋白在细胞内形成均聚物，帮助细胞质、丝状结构和网状结构的稳定形成。Desmin通过在心脏、骨骼和平滑肌中执行功能来保持机体的机械完整性。结蛋白通过网格蛋白连接于肌原纤维的Z线，使临近的肌原纤维彼此连接，起到动力传导作用。同时，结蛋白把肌原纤维与细胞核、肌膜下细胞骨架和胞浆内的细胞器连接，起到细胞内信号传导作用。结蛋白异变会导致几种不同类型的心肌病、肌原纤维肌病和肌肉营养不良等，严重时还会导致及肌间线蛋白病的发生。另外结蛋白在线粒体的定位、分布和功能中起着重要作用。它还参与松弛调节所需的细胞腺苷三磷酸盐的生产。[0003]结蛋白是肌源性肿瘤的标志物，可以用于鉴定肌源性肿瘤,同时也有研究表明结蛋白对于肿瘤细胞的迁移及侵袭能力有影响。再者结蛋白还是左心室收缩功能的标志，也是心衰患者一个重要的预后指标。因此获取活性更高的抗Desmin单克隆抗体对于临床诊断和科学研究具有重要意义。