抗β-catenin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112457400A(43)申请公布日2021.03.09(21)申请号202011449336.8C12N5/20(2006.01)(22)申请日2020.12.09G01N33/68(2006.01)G01N33/577(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/91(2006.01)CGMCCNO.196852020.04.24(71)申请人福州迈新生物技术开发有限公司地址350108福建省福州市闽侯县科技东路3号福州高新区海西高新技术产业园创新园12号楼(72)发明人彭永辉杨清海王小亚高慧然李恢波黄信超邓晓李玲玲(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人方圆林祥翔(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书6页C07K16/18(2006.01)序列表3页附图2页(54)发明名称抗β-catenin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗β‑catenin蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。发明人还提供了抗β‑catenin蛋白单克隆抗体的制备方法，选取人β‑catenin氨基酸第699‑712位蛋白并与KLH偶联，作为免疫原。发明人还提供了一株分泌抗β‑catenin蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系3B1D11A8，保藏号为：CGMCCNO.19685。抗β‑catenin蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达β‑catenin蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。CN112457400ACN112457400A权利要求书1/1页1.一种抗β-catenin蛋白单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的核苷酸序列所编码。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别β-catenin蛋白。4.根据权利要求3所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别β-catenin蛋白中SEQIDNO.1所示的氨基酸序列。5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体由保藏号为CGMCCNO.19685的杂交瘤细胞系产生。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述抗β-catenin蛋白单克隆抗体为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。7.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体的制备过程，选取β-catenin蛋白氨基酸序列第699位至第712位氨基酸并与载体蛋白KLH偶联作为免疫原。8.一株分泌抗β-catenin蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系3B1D11A8，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNO.19685。9.权利要求1-8任一所述的抗β-catenin蛋白单克隆抗体，在β-catenin蛋白免疫检测中的用途。10.根据权利要求9所述的免疫检测，其特征在于，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。2CN112457400A说明书1/6页抗β-catenin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗β-catenin蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。背景技术[0002]β-连环蛋白(β-catenin)最早于1980年由德国细胞生物学家WaltBirchmeier发现。在肿瘤细胞的侵袭与转移过程中，其中一个重要的环节就是重组细胞骨架、拆解及组装细胞间的粘附，adhesion/catenin复合体对调节细胞间粘附起主要作用，而β-catenin是该复合体的重要组成部分，对连接细胞外粘附因子、细胞骨架以及维持上皮细胞正常形态起重要作用。并且肿瘤迁移相关的蛋白如：MMP、CD44和纤连蛋白也受β-catenin/Wnt信号通路的调控。[0003]β-catenin其编码基因CTNNBI位于染色体3p22～p21.3，全长23.2kb，包含16个外显子，启动子区富含GC，并包含TATA盒。β-catenin是一种相对分子质量为92000的多功能蛋白质，拥有独特的N端和C端，其间含有12个Armadillo(arm)重复区。β-catenin的N端包含130个氨基酸残基，富含丝氨酸和苏氨酸残基，这些残基易被磷酸化而降低β-c