抗GH蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113845595A(43)申请公布日2021.12.28(21)申请号202111357653.1C12N5/20(2006.01)(22)申请日2021.11.16G01N33/74(2006.01)G01N33/577(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNO.223152021.04.29(71)申请人福州迈新生物技术开发有限公司地址350108福建省福州市闽侯县科技东路3号福州高新区海西高新技术产业园创新园12号楼(72)发明人黄信超李玲玲彭永辉陈惠玲杨清海(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人方圆(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书6页C07K16/26(2006.01)序列表3页附图1页(54)发明名称抗GH蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗GH蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。发明人还提供了一株分泌抗GH蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系9D5D2A9，保藏号为：CGMCCNO.22315。抗GH蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达GH蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。CN113845595ACN113845595A权利要求书1/1页1.一种抗GH蛋白单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的核苷酸序列所编码。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体制备过程中，免疫小鼠所用的抗原为SEQIDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别人GH蛋白。5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体由保藏号为CGMCCNO.22315的杂交瘤细胞系产生。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述抗GH蛋白为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。7.一种抗GH蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于,其免疫小鼠所用的抗原为SEQIDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。8.一株分泌抗GH蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系9D5D2A9，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNO.22315。9.权利要求1‑6任一所述的抗GH蛋白单克隆抗体在人GH蛋白免疫检测中的用途。10.一种人GH蛋白免疫检测试剂，其特征在于，所述免疫检测试剂内含有权利要求1‑6任一所述的抗GH蛋白单克隆抗体为有效成分。2CN113845595A说明书1/6页抗GH蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗GH蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。背景技术[0002]人生长激素(hGH由脑垂体前叶的嗜酸性细胞分泌，是由191个氨基酸残基构成的单肽链蛋白质激素，分子量约为22000，含有两对二硫键且无糖基化修饰。具有刺激新陈代谢，促进组织、器官、骨骼以及整个人体发育成熟等功能，是个体生长发育过程中最重要的内分泌激素之一。hGH的分泌与释放受到GHRH和生长抑素(Somatostatin)的双向调控，其绝大多数的生理学作用都是通过GH‑IGF轴来实现的。下丘脑垂体在GHRH的作用下释放hGH，hGH与肝脏或其他组织器官上GHR结合，通过GHR‑JAK‑STAT信号通路启动细胞核内的应答基因表达IGFs、IGFBP3和ALS，三者结合组成的三元络合物进入到血管，然后被输送到各个靶器官，再由蛋白酶降解去除IGFBP3和ALS，释放出IGFs实现生长激素的生物学作用。[0003]垂体腺瘤是发病率第二位的中枢神经系统良性肿瘤,是鞍区最常见的肿瘤。垂体是人体内分泌中枢,其前叶由多种内分泌细胞组成。不同垂体前叶细胞分泌不同种类激素,如生长激素(growthhormomGH)、促肾上腺皮质激素、泌乳素、促甲状腺激素等。起源于分泌GH的垂体前叶细胞的肿瘤称为垂体GH腺瘤。过量GH及IGF‑1影响患者多个内脏系统及内环境,导致心脏增大、呼吸道软组织增厚、肝脾增大、糖代谢紊乱、脂质再分布、物质代谢紊乱以及其他激素代谢异常等M。[0004]垂体腺瘤的诊断除了依据临床症状、血清相关激素水平、影像学检