一种肝素定量检测试剂盒及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113174425A(43)申请公布日2021.07.27(21)申请号202110423725.1(22)申请日2021.04.20(71)申请人普迈德（北京）科技有限公司地址100000北京市昌平区马池口镇昌流路738号8#楼三层C区(72)发明人田茹耿强黄改荣余占江陈永强(74)专利代理机构北京国林贸知识产权代理有限公司11001代理人郑俊彦(51)Int.Cl.C12Q1/56(2006.01)G01N33/86(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种肝素定量检测试剂盒及其应用(57)摘要本发明提供了一种肝素定量检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括试剂R1、试剂R2、试剂L1和试剂L2；试剂R1中包括复合磷脂、凝血因子Xa、凝血因子激活剂RVV‑V；试剂R2中包括氯化钙；试剂L1为包括哺乳动物血浆和普通肝素的普通肝素质控品；试剂L2为包括哺乳动物血浆和低分子肝素的低分子肝素质控品。本发明所述的试剂盒组成凝血酶原酶复合物，直接激活凝血酶原，无需对样品进行预处理，操作方便、检测时间更短，并且不受接触途径和组织因子途径蛋白完整性的影响；同时适合多种类型的待测样品及不同操作环境，实现样品中肝素准确、快速的定量测定。CN113174425ACN113174425A权利要求书1/1页1.一种肝素定量检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括括试剂R1、试剂R2、试剂L1和试剂L2；所述试剂R1中包括复合磷脂、凝血因子Xa、凝血因子激活剂RVV‑V；所述试剂R2中包括氯化钙；所述试剂L1为包括哺乳动物血浆和普通肝素的普通肝素质控品；所述试剂L2为包括哺乳动物血浆和低分子肝素的低分子肝素质控品。2.根据权利要求1所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1中还包括缓冲液、保护剂和防腐剂。3.根据权利要求1所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中所述复合磷脂为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸的混合物；试剂R1中所述复合磷脂的浓度为1~200μg/ml，其中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰丝氨酸的的重量份数比为（1~2）:（3~5）:（1~3）。4.根据权利要求1所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中所述凝血因子Xa为活化状态的凝血因子Xa，其在试剂R1中的浓度为0.01~10nkat/ml。5.根据权利要求1所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中所述凝血因子激活剂RVV‑V提取自蝰蛇蛇毒，其在试剂R1中的浓度为0.1~10U/ml。6.根据权利要求2所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中所述缓冲液为Tris‑Hcl缓冲体系。7.根据权利要求2所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R1中所述保护剂的组分包括乙二胺四乙酸（EDTA）、氯化钠、甘露醇、牛血清白蛋白和海藻糖。8.根据权利要求1所述的肝素定量检测试剂盒，其特征在于，试剂R2中氯化钙的浓度为20~100mM。9.一种如权利要求1~8任一项所述试剂盒的应用，其特征在于，利用如权利要求1~8任一项所述试剂盒进行肝素的定量检测，适用于包括血凝仪平台和血栓弹力图平台在内的多个检测平台。10.根据权利要求9所述试剂盒的应用，其特征在于，适用的检测对象包括人全血和血浆。2CN113174425A说明书1/5页一种肝素定量检测试剂盒及其应用技术领域[0001]本发明属于医学检测技术领域，具体到临床凝血检测，特别涉及一种肝素定量检测试剂盒及其应用。背景技术[0002]肝素最先由肝脏发现并由此而得名，肝素作为一种天然抗凝血物质广泛存在于哺乳动物肝脏、肺脏、血管壁、肠粘膜等组织中。目前肝素作为抗凝血药物广泛应用于临床抗凝血治疗，主要包括普通肝素、低分子肝素、肝素衍生物（如磺达肝癸钠）等。普通肝素作为一种混合物，分子量范围在3000~30000KD，平均分子量约15000KD。低分子肝素是普通肝素裂解后的硫酸氨基葡聚糖片段，也是一种混合物，分子量范围在3000~5000KD。磺达肝癸钠又称磺达肝素，是化学合成的戊聚糖甲基衍生物，分子量约1700KD。普通肝素、低分子肝素和磺达肝素都可以与抗凝血酶III结合，提高抗凝血酶III与凝血因子Xa的亲和力，增强抗凝血因子Xa的作用。普通肝素分子量大可以同时与抗凝血酶III和凝血因子IIa结合，发挥抗凝血因子IIa的作用。普通肝素可以同时抑制凝血因子IIa和凝血因子Xa，比例为1:1；低分子肝素可以以2~4:1的比例抑制凝血因子Xa和IIa；磺达肝素只可以抑制凝血因子Xa。[0003]肝素用于防治血栓形成或栓塞性疾病（如心肌梗塞、血栓性静脉炎、肺栓塞等）；各种原因引起的弥漫性血管内凝血（DIC）；也用于血液透析