一种高特异检测肝素结合蛋白的试剂盒及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113777326A(43)申请公布日2021.12.10(21)申请号202111066374.XG01N21/76(2006.01)(22)申请日2021.09.13(71)申请人北京森美希克玛生物科技有限公司地址100176北京市北京经济技术开发区地盛西路6号院8号楼3层301(72)发明人肖文峰庞启锋胡国茂(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463代理人覃蛟(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/58(2006.01)G01N33/577(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/533(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图1页(54)发明名称一种高特异检测肝素结合蛋白的试剂盒及其应用(57)摘要本发明公开了一种高特异检测肝素结合蛋白的试剂盒及其应用，涉及免疫检测技术领域，该试剂盒包括联接有异硫氰酸荧光素的HBP结合抗体、标记有发光标记物的HBP标记抗体以及表面包被了异硫氰酸荧光素抗体的固相载体，通过异硫氰酸荧光素与抗异硫氰酸荧光素系统对样本进行检测，很好地避免内源性生物素的干扰，并且特异性高、稳定性好，在检出限上更有优势。CN113777326ACN113777326A权利要求书1/2页1.一种用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，其包括以下组分：HBP结合抗体、HBP标记抗体、固相载体以及用于偶联在所述固相载体表面的异硫氰酸荧光素抗体；其中，所述HBP结合抗体为联接有异硫氰酸荧光素的HBP抗体；所述HBP标记抗体为发光标记物标记的HBP抗体。2.根据权利要求1所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述发光标记物选自吖啶类化合物和碱性磷酸酶中的至少一种；优选地，所述发光标记物为吖啶类化合物；优选地，所述发光标记物包括吖啶酯和/或吖啶磺酰胺；优选地，所述试剂盒还包括发光底物；当所述发光标记物为吖啶类化合物时，所述发光底物为过氧化物，当所述发光标记物为碱性磷酸酶时，所述发光底物为AMPPD。3.根据权利要求1所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述HBP抗体中的抗体选自：单克隆抗体、多克隆抗体或抗体功能性片段中的至少一种；优选地，所述HBP抗体为HBP单克隆抗体。4.根据权利要求1所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述固相载体与所述异硫氰酸荧光素抗体为偶联状态。5.根据权利要求1所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为磁微粒；优选地，所述磁微粒的表面修饰有羧基、氨基和甲苯磺酰基中的至少一种基团；优选地，所述磁微粒的直径为0.5～5μm。6.根据权利要求1所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述HBP结合抗体由以下步骤制备获得：将HBP抗体与异硫氰酸荧光素按照1mg：(100～200g)的比例进行混合；在混合后的产物中加入1～10MNH4Cl溶液至NH4Cl终浓度为50mmol/L，以终止反应；将终止反应后的产物在缓冲液中进行透析，透析后采用稀释液稀释至所需浓度，获得HBP结合抗体。7.根据权利要求1～6任一项所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括：缓冲液、稀释液、校准品、质控品以及清洗液中的至少一种；优选地，所述稀释液中含0.1～3wt％的BSA，0.1～1wt％Proclin‑300以及0.01～1mol/L，pH7.2～7.6的磷酸盐缓冲液。8.根据权利要求7所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒，其特征在于，所述校准品和/或所述质控品为：肝素结合蛋白与基质液混合配制而成；优选地，所述校准品和/或所述质控品中的肝素结合蛋白为重组肝素结合蛋白；优选地，所述基质液含有：1～5wt％的BSA,0.01～0.1mol/LNaCl，0.01～0.5wt％的Proclin‑300以及0.01～0.1mol/LpH7.2～7.6的磷酸盐缓冲液。9.一种用于检测肝素结合蛋白的方法，其特征在于，其包括：采用如权利要求1～8任一项所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒对待测样本中的肝素结合蛋白进行检测；所述方法不以疾病的诊断或治疗为直接目的。10.如权利要求1～8任一项所述的用于检测肝素结合蛋白的试剂盒在诊断感染性疾病中的应用；2CN113777326A权利要求书2/2页优选地，所述感染性疾病为与HBP相关的感染性疾病。3CN113777326A说明书1/11页一种高特异检测肝素结合蛋白的试剂盒及其应用技术领域[0001]本发明涉及免疫检测技术领域，具体而言，涉及一种高特异检测肝素结合蛋白的试剂盒及其应用。背景技术[0002]感染性疾病是一类对健康威胁比较严重的疾病,脓毒症