抗PR蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113583132A(43)申请公布日2021.11.02(21)申请号202111037447.2C12N15/12(2006.01)(22)申请日2021.09.06C12N15/70(2006.01)G01N33/74(2006.01)(71)申请人福州迈新生物技术开发有限公司G01N33/577(2006.01)地址350108福建省福州市闽侯县科技东路3号福州高新区海西高新技术产业园创新园12号楼(72)发明人陈惠玲杨清海王小亚周洪辉高惠然吴楠楠(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人方圆林祥翔(51)Int.Cl.C07K16/28(2006.01)C07K14/72(2006.01)C12N15/13(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表4页附图2页(54)发明名称抗PR蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及一种可以识别人PR抗原的单克隆抗体，其制备方法以及其在免疫检测中的用途。本发明提供一种抗PR蛋白兔单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.5所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。该抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达PR蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。CN113583132ACN113583132A权利要求书1/1页1.一种抗PR蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.5所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的编码DNA序列为SEQIDNO.3所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的编码DNA序列为SEQIDNO.4所示的核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别PR蛋白。4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为兔单克隆抗体。5.一种抗PR蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，用于免疫兔的抗原为重组蛋白，所述重组蛋白由大肠杆菌重组表达；选择306‑455位点的蛋白片段，其为SEQIDNO.1所示的氨基酸序列；优化成适合在大肠杆菌表达的基因片段,其为SEQIDNO.2所示的核苷酸序列；并将该基因片段克隆至pGEX‑4T‑AB1载体上。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述重组蛋白包含GST蛋白标签和组氨酸蛋白标签。7.权利要求1‑4任一所述的单克隆抗体在PR蛋白免疫检测中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。9.一种PR蛋白免疫组化检测试剂，其特征在于，所述免疫组化检测试剂含有权利要求1‑4任一所述的抗PR蛋白单克隆抗体为其有效成分。2CN113583132A说明书1/6页抗PR蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物医学工程领域，特别涉及一种抗PR蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。背景技术[0002]PR(Progesteronereceptor，孕激素受体)是一种蛋白质分子,是属于甾类激素超家族的细胞内核受体，可与相应的激素结合而发生特异性的反应进而形成激素‑受体复合物，使激素发挥其生物学效应。孕激素受体有两种异构体即PR‑A和PR‑B，它们由三种结构域构成：C‑端结构域主要与孕激素结合，中央结构域是与DNA结合区域，N‑端结构域目前此区域结构不明，可能参与多种反应。[0003]PR是一个具有双重功能的蛋白，既能以配体依赖的方式作为转录因子直接与核内DNA作用调节转录，又能作为非转录因子调节核外的信号通路。在介导与调节卵巢、子宫和乳腺的功能及生殖活动中起着关键的作用。表达于正常及良恶性子宫内膜和乳腺上皮细胞。[0004]研究已经证实ER、PR的表达水平与乳腺癌患者的总生存率、无瘤生存率、无复发生存率、无进展生存率及临床有效率密切相关。研究显示PR状态是独立于ER状态的预测指标，特别是对于绝经前的乳腺癌患者。PR常与ER和HER‑2一起作为乳腺癌患者的常规免疫组化检测项目。发明内容[0005]发明人提供了一种抗PR蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.5所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQIDNO.6所示的氨基酸序列。[0006]进一步地，所述单克隆抗体的重链可变区的DNA序列为SEQIDNO.3所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的DNA序列为SEQIDNO