检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113820486A(43)申请公布日2021.12.21(21)申请号202111181125.5G01N33/533(2006.01)(22)申请日2021.10.11(71)申请人河南沃迈生物科技有限公司地址453822河南省新乡市获嘉县产业集聚区南区(亢村镇)纬五路与迎宾大道交叉口(72)发明人张文磊张保龙杨五科唐浩淳王凯利王浦银郑金平张红举王琳(74)专利代理机构河南新风向知识产权代理事务所(普通合伙)41213代理人孙春慧(51)Int.Cl.G01N33/573(2006.01)G01N33/558(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图1页(54)发明名称检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒及其制备方法(57)摘要本发明公开了检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒及其制备方法，包括底板、样品垫、结合垫、检测线、NC膜、质控线、棉浆板，其特征在于：底板上设有样品垫、结合垫、NC膜与棉浆板；所述的样品垫一端设置在底板上，另一端粘压在结合垫一侧；结合垫另一侧叠压在NC膜的左侧；棉浆板一端叠压在NC膜的右侧，另一端粘接在底板上；本发明的试剂盒具有操作简便、费用低廉、检测时间短、灵敏度高且能同时检测胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原Ⅱ等优点，易于大规模生产。CN113820486ACN113820486A权利要求书1/1页1.检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒；包括底板、样品垫、结合垫、检测线、NC膜、质控线、棉浆板，其特征在于：底板上设有样品垫、结合垫、NC膜与棉浆板；所述的样品垫一端设置在底板上，另一端粘压在结合垫一侧；结合垫另一侧叠压在NC膜的左侧；棉浆板一端叠压在NC膜的右侧，另一端粘接在底板上；所述的结合垫上包被有包被有荧光微球标记的胃蛋白酶原Ⅰ抗体和胃蛋白酶原Ⅱ抗体；所述的NC膜上设有检测线和质控线；所述的检测线包被有荧光微球标记的胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体；所述的质控线包被羊抗兔IgG抗体。2.根据权利要求1所述的检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒,其特征在于：所述荧光微球的粒径为150nm。3.根据权利要求1所述的检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒，其特征在于：所述的检测线可设置两条，一条检测线包被有荧光微球标记的胃蛋白酶原Ⅰ单克隆抗体；另一条检测线包被有荧光微球标记的胃蛋白酶原Ⅱ单克隆抗体。4.根据权利要求1‑3任一项所述的检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：a.抗体包被：选用直径为150nm的荧光微球，将胃蛋白酶原Ⅰ抗体、胃蛋白酶原Ⅱ抗体和羊抗兔IgG抗体标记到荧光微球上，将制备好的时间分辨荧光微球标记胃蛋白酶原Ⅰ抗体、胃蛋白酶原Ⅱ抗体和羊抗兔IgG抗体按照1:1:1比例混合；b.结合垫包被：使用定量喷液装置将a步骤中的混合液喷涂于处理过的结合垫上后49℃烘干2小时；c.NC膜的制备：使用包被胃蛋白酶原Ⅰ抗体、胃蛋白酶原Ⅱ抗体分别稀释到150mmol/L；羊抗兔IgG抗体稀释到100mmol/L；使用定量喷液装置将上述抗体喷印到对应的检测区、和质控区；避光，在42℃烘干12小时，加入干燥剂封存备用；d.试剂盒的组装：在底板上依次粘贴样品垫、结合垫、NC膜和棉浆板，切割成宽度为4mm、长度为6.5cm检测试纸，封装即得试剂盒。2CN113820486A说明书1/4页检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及检测胃蛋白酶原I和II的免疫层析试剂盒及其制备方法。背景技术[0002]胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体，根据其生化性质和免疫原性将其分成2个亚群，1‑5组分的免疫原性相同，称为胃蛋白酶原I，主要由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌；组分6和7被称为胃蛋白酶原II，除由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌外，贲门腺和胃窦的幽门腺的黏液颈细胞以及十二指肠上段也能产生胃蛋白酶原II。[0003]通常情况下，约有1%的PG透过胃黏膜毛细血管进入血液循环，进入血液循环的PG在血液中非常稳定。血清PGI和PGII反映胃黏膜腺体和细胞的数量，也间接反映胃黏膜不同部位的分泌功能。当胃黏膜发生病理变化时，血清PG含量也随之改变。因此，监测血清中PG的浓度可以作为监测胃黏膜状态的手段。[0004]目前，临床胃部疾病及胃癌的检测手段主要包括内窥镜、B超、X线检测、肿瘤标志物等。[0005]相比其他胃部检测手段，血清PGI、PGII联合检测具有无创伤、操作简便、结果可靠和费用低廉等特点，目前已建立多种检测方法，如乳胶增强免疫比浊法、酶联免疫法、化学发光法、胶体金免疫层析法等，并且已经在各级医疗机构广泛应用。但是胶体金法灵敏度较低，无法准确定