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本发明公开了一种定量检测MxA蛋白的免疫荧光层析试剂盒及其制备方法,由以下步骤组成,荧光微球活化;偶联:抗MxA单克隆抗体或鸡IgY抗体与荧光微球质量比0.1~0.2:1混合偶联,封闭处理、离心,重悬,得到荧光微球标记后的抗MxA单克隆抗体;标记垫喷荧光微球;硝酸纤维素膜喷涂划线;将样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜和吸水纸在PVC底板上顺次相互搭接粘贴。本发明制备的定量检测MxA蛋白的免疫荧光层析试剂盒检测灵敏度高,线性范围宽,检测稳定性和重复性优异。