一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒、及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102128928A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102128928A(43)申请公布日2011.07.20(21)申请号201010574246.1(22)申请日2010.11.30(71)申请人中国人民解放军第二炮兵总医院地址100088北京市西城区新街口外大街16号申请人北京科跃中楷生物技术有限公司(72)发明人陈秀柳静(74)专利代理机构北京法思腾知识产权代理有限公司11318代理人高宇杨小蓉(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)G01N33/573(2006.01)G01N21/76(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图1页(54)发明名称一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒、及其制备方法(57)摘要本发明涉及免疫检测领域，具体地涉及一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒及其方法。根据本发明的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，包括：1)胃蛋白酶抗原校准品；2)样品收集液，pH2-3；3)样品稀释液，pH6-8；4)胃蛋白酶抗体包被的微孔板；5)胃蛋白酶抗体标记物；6)化学发光底物液；以及7)浓缩洗涤液。本发明的试剂盒可以检测出胃液中、食管内容物、咽喉部分泌物、鼻咽部分泌物、气管支气管分泌物中的胃蛋白酶含量，并且根据是否可以检出胃蛋白酶来判断是否存在胃食管反流，根据检出胃蛋白酶含量可以判断胃部病变治疗的效果及其病情的变化。它具有无创、简便、快速、灵敏、稳定等优点。CN10289ACCNN110212892802128936A权利要求书1/1页1.一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：1)胃蛋白酶抗原校准品；2)样品收集液，pH2-3；3)样品稀释液，pH6-8；4)胃蛋白酶抗体包被的微孔板；5)胃蛋白酶抗体标记物；6)化学发光底物液；以及7)浓缩洗涤液。2.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述样品收集液的配方为一水柠檬酸21gProclin3001mL双蒸水定容至1000mL。3.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液的配方为NaH2PO4·2H2O0.6gNa2HPO4·12H2O5.8gNaCl8.766g牛血清白蛋白10gProclin3001mL双蒸水定容至1000mL。4.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述标记物为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、生物素及其衍生物。5.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物液为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。6.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述的胃蛋白酶抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。7.根据权利要求1所述的胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述抗体源自鼠、兔、山羊、绵羊、豚鼠、牛、驴、马、鸡、猴子。8.一种制备权利要求1所述试剂盒的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1)配制胃蛋白酶抗原校准品；2)以胃蛋白酶抗体包被微孔板；3)标记胃蛋白酶抗体，得胃蛋白酶抗体标记物；4)配制样品收集液，其pH为2-3；5)配制样品稀释液，其pH为6-8；6)配制化学放光底物液；7)配制浓缩洗涤液；8)分装抗原校准品、胃蛋白酶抗体标记物、化学发光底物液和浓缩洗涤液；以及9)组装为成品。2CCNN110212892802128936A说明书1/9页一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒、及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及免疫检测领域，具体地涉及一种胃蛋白酶化学发光免疫检测试剂盒及其方法。背景技术[0002]胃蛋白酶(pepsin)属于天冬氨酸蛋白水解酶类，是胃消化蛋白水解酶，相对分子量为31-36kd，其前体是胃蛋白酶原，胃蛋白酶原在成年脊椎动物胃黏膜中合成，由胃主细胞分泌，在胃液的酸性条件下转换成胃蛋白酶。其功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。[0003]胃食管返流病(GERD)是指胃肠内容物返流入食管引起返酸、烧心、胸痛等消化道症状，进而严重影响生活质量并可导致食管癌前病变的疾病。是一种非常常见的影响生活质量的食管疾患，其发病原因主要是食管抗反流屏障减弱或食管黏膜长时间暴露于胃液之下，致使胃酸和胃蛋白酶损害食管粘膜。部分患者需终身服用抑酸制剂，部分患者则需行腹腔镜下胃底折叠术治疗来控制。[0004]通常情况下，食管下括约肌(LES)在吞咽时开放，随后关闭防止胃酸返流入食管。静息时LES压力足以防止食物返流。LES的不当松弛可导致胃酸返流入食管，引起刺激反应。胃食管返流疾病(GERD)的发病机理与食管胃动力有关，包括食管清除能力下降和胃排空延迟。50％的病人有食管蠕动功能的丧失。食管