抗CD38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113912727A(43)申请公布日2022.01.11(21)申请号202111357686.6C12N5/20(2006.01)(22)申请日2021.11.16G01N33/68(2006.01)G01N33/577(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/91(2006.01)CGMCCNO.223192021.04.29(71)申请人福州迈新生物技术开发有限公司地址350108福建省福州市闽侯县科技东路3号福州高新区海西高新技术产业园创新园12号楼(72)发明人李恢波王小亚杨清海彭永辉黄信超高慧然(74)专利代理机构福州市景弘专利代理事务所(普通合伙)35219代理人方圆(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书6页C07K16/28(2006.01)序列表3页附图1页(54)发明名称抗CD38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及生物检测领域，提供了一种抗CD38蛋白单克隆抗体,其重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。其制备方法中，免疫小鼠所用的抗原为SEQIDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。发明人还提供了一株分泌抗CD38蛋白的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系13B5B11C8，保藏号为：CGMCCNO.22319。抗CD38蛋白单克隆抗体,具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达CD38蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。CN113912727ACN113912727A权利要求书1/1页1.一种抗CD38蛋白单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区的氨基酸序列分别是SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述单克隆抗体重链和轻链可变区氨基酸序列分别是SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示的核苷酸序列所编码。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体制备过程中，免疫小鼠所用的抗原为SEQIDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别人CD38蛋白。5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体由保藏号为CGMCCNO.22319的杂交瘤细胞系产生。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于,所述抗CD38蛋白为小鼠IgG1亚型单克隆抗体。7.一种抗CD38蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于,其免疫小鼠所用的抗原为SEQIDNO.1所示核苷酸序列编码，经由大肠杆菌重组表达的重组蛋白。8.一株分泌抗CD38蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，所述细胞系为小鼠杂交瘤细胞系13B5B11C8，所述细胞系保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNO.22319。9.权利要求1‑6任一所述的抗CD38蛋白单克隆抗体在人CD38蛋白免疫检测中的用途；所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。10.一种人CD38蛋白免疫检测试剂，其特征在于，所述免疫检测试剂内含有权利要求1‑6任一所述的抗CD38蛋白单克隆抗体为有效成分。2CN113912727A说明书1/6页抗CD38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物检测领域，特别涉及抗CD38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用。背景技术[0002]CD38是一种单链跨膜Ⅱ型糖蛋白，分子量为45kD，包括1个长的羧基端胞外区(258个氨基酸)，1个跨膜区(21个氨基酸)和1个短的氨基端胞内区(21个氨基酸)。人类CD38基因位于4号染色体(4p15),延伸超过62kb。该基因包含7个内含子和8个编码CD38蛋白的外显子。[0003]CD38是一种具有受体和酶介导功能的多功能蛋白，可作为受体、黏附分子和外切酶。CD38有多种生理功能,可作为受体、黏附分子和外切酶。CD38主要表达于淋系和髓系细胞,也在一些非造血细胞低水平表达(如前列腺上皮细胞,胰腺B细胞,破骨细胞,视网膜细胞等)。在正常人体中，约有20％的人骨髓细胞表达CD38,主要分布在浆细胞、髓细胞、红系细胞、前体细胞以及小部分T细胞中。外周血液中，90％的浆细胞为CD38阳性，自然杀伤细胞和单核细胞中约有60％表达CD38。大多数髓样胸腺细胞均表达CD38,循环T细胞则不表达,而又在活化的T细胞中诱导表达。早期的干细胞和祖细胞均不表达CD38,但也在B细胞上表达,且浆细胞CD38表达水平特别高,这些特点使CD38成为了治疗浆细胞疾病