STCH基因敲除动物模型的构建方法及应用.pdf

本发明涉及STCH基因敲除动物模型的构建方法及应用。本发明的STCH基因敲除动物模型可作为抑郁和/或痴呆发病研究的动物模型，本发明采用基因敲除技术制备STCH基因敲除动物模型，通过动物行为学检测，该小鼠出现随着年龄增长抑郁样症状(强迫游泳、悬尾实验)和记忆功能障碍(水迷宫)，具有抑郁症和痴呆样症状，可用于抗抑郁和痴呆药物的筛选。

2024-01-07

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Bag5基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用.pdf

本发明首次公开了Bag5基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用，属于生物技术领域。构建方法包括：通过高效的CRISPR/Cas9基因编辑技术，根据Bag5基因序列确定Bag5小鼠待敲除基因的两条特异性靶点gRNA1和gRNA2，并与Cas9核酸酶体外转录成mRNA，显微注射入小鼠受精卵并移植至代孕母鼠输卵管内，待产出小鼠后传代培养，经基因型鉴定得到稳定遗传的Bag5基因敲除小鼠动物模型。本发明首次在Bag5敲除小鼠模型中鉴定出无头精子症的不可育表型，通过ICSI技术，将精子头注射入发育良好的卵细胞内，成功使

2023-06-03

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一种Ifnar1基因敲除小鼠动物模型的构建方法及其应用.pdf

本发明属于转基因技术领域，具体地涉及一种Ifnar1基因敲除小鼠动物模型的构建方法和应用，所述方法包括使用CRISPR‑Cas9靶向敲除小鼠Ifnar1基因，包括以下步骤：选择小鼠Ifnar1基因的外显子2作为敲除区域，crRNA设计在外显子2两边的内含子中；合成针对Ifnar1基因的crRNA1，序列如SEQIDN0.1所示；合成针对Ifnar1基因的crRNA2，序列如SEQIDN0.2所示。本发明利用CRISPR/Cas9系统能够快速高效的将目的Ifnar1基因大片段敲除，并且不留下外源基因

2023-07-22

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一种Nf1基因敲除动物模型的构建方法.pdf

本申请公开了一种Nf1基因敲除动物模型的构建方法，设计识别Nf1基因的gRNA；进行体外转录，获得Cas9mRNA和gRNA；构建同源重组载体；将Cas9mRNA、gRNA和同源重组载体显微注射到动物的受精卵中，获得F0代动物；将阳性F0代动物与野生型动物交配，获得F1代动物，即为Nf1基因敲除动物模型。该动物模型是国内首个成功成瘤的I型神经纤维瘤转基因动物模型，为I型神经纤维瘤发生发展机制的研究以及靶向治疗的等治疗方案探索提供稳定可靠的体内模型平台，弥补了目前相关模型缺乏的不足。

2023-07-24

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双基因敲除重组红球菌、构建方法及其应用.pdf

本发明公开了一种构建双基因敲除的重组红球菌的方法，包括：(1)根据红球菌的腈水合酶基因序列，设计引物以分别扩增腈水合酶基因的上游序列和下游序列，获得腈水合酶基因的上游片段和下游片段；(2)将腈水合酶基因的上游片段和下游片段插入到自杀质粒中，获得重组自杀质粒，自杀质粒携带卡那霉素抗性基因和蔗糖果聚糖酶基因；(3)利用重组自杀质粒转化敲除了酰胺酶基因的重组红球菌的感受态细胞，获得双基因敲除的重组红球菌，其中包括，通过卡那霉素抗性进行第一轮筛选，获得第一重组菌落，通过蔗糖平板对第一重组菌落进行第二轮筛选。还公开

2023-09-15

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