氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102974327A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102974327A(43)申请公布日2013.03.20(21)申请号201210542339.5G01N30/06(2006.01)(22)申请日2012.12.14(71)申请人重庆大学地址400044重庆市沙坪坝区沙正街174号申请人重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心(72)发明人杨眉李贤良侯长军郗存显李俊杰王国明张雷霍丹群(74)专利代理机构重庆博凯知识产权代理有限公司50212代理人李海华(51)Int.Cl.B01J20/26(2006.01)B01J20/28(2006.01)B01J20/281(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书77页页附图附图44页(54)发明名称氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱(57)摘要本发明公开了一种氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，在柱形壳体内装填有分子印迹聚合物微球，分子印迹聚合物微球制备方法为：以3-氨基丙基三乙氧基硅烷或苯基三乙氧基硅烷为功能单体，正硅酸乙酯为交联剂，氨基糖苷类抗生素为模板分子，采用溶胶凝胶法进行水解缩合，在活化硅胶的表面形成Si-O-Si键的刚性网络结构，形成聚合物微球；通过模板分子的洗脱，即得到分子印迹聚合物微球。本萃取柱用于动物性食品中氨基糖苷类抗生素兽药残留检测前样品预处理时对目标物的分离与富集，对目标物能选择性吸附，具有分离、净化、富集操作步骤简单、快速，有机溶剂消耗少，重复使用次数高等优点。CN1029743ACN102974327A权利要求书1/1页1.氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，其特征在于：在柱形壳体内装填有分子印迹聚合物微球，柱形壳体的两端分别设有聚四氟乙烯筛板；所述分子印迹聚合物微球通过如下步骤制得：1）首先对硅胶进行活化；2）以3-氨基丙基三乙氧基硅烷和苯基三乙氧基硅烷之一或者两者任意比例的混合物为功能单体，正硅酸乙酯为交联剂，氨基糖苷类抗生素为模板分子，采用溶胶凝胶法进行水解缩合，在活化硅胶的表面形成Si-O-Si键的刚性网络结构，形成聚合物微球；3）通过模板分子的洗脱，将结合在聚合物微球中的模板分子洗脱下来，从而在硅胶表面留下对模板分子特异性识别的孔道结构，即得到所述的分子印迹聚合物微球。2.根据权利要求1所述的氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，其特征在于：所述溶胶凝胶法进行水解缩合具体步骤为：将1M模板分子溶入60ml四氢呋喃和10ml双蒸水的混合溶液中搅拌30分钟，然后加入2M功能单体；电磁搅拌30分钟后再加入8M正硅酸乙酯，再搅拌30分钟加入1g第1）步的活化硅胶；30分钟后加入10ml无水乙醇和对应催化剂；混合物在20℃下电磁搅拌反应30小时；将所得产物离心分离，并用无水乙醇和去离子水交替清洗除去未反应完全的试剂，然后70℃真空干燥30小时，即得到聚合物微球。3.根据权利要求1所述的氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，其特征在于：所述硅胶活化工艺为，将硅胶浸泡入一定浓度的硝酸溶液中，恒定温度下搅拌活化恒定时间，然后将处理后的硅胶过滤并用去离子水反复洗涤至中性，真空干燥至恒重即可。4.根据权利要求1所述的氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，其特征在于：所述硅胶活化工艺为，将硅胶浸入浓度为的6M的浓硝酸溶液中50℃条件下回流4个小时，溶液用电磁加热套电磁恒温搅拌，搅拌速度420rpm；然后将所得产物离心分离并用去离子水反复洗涤至中性，最后置于70℃的烘箱中，真空干燥12小时即可。5.根据权利要求1所述的氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱，其特征在于：第3）步模板分子的洗脱方法为，用1:4的冰醋酸/甲醇混合溶剂对所得聚合物微球索氏提取30小时。2CN102974327A说明书1/7页氨基糖苷类药物分子印迹固相萃取柱技术领域[0001]本发明涉及兽药残留检测技术的改进，具体涉及一种动物性食品中氨基糖苷类抗生素兽药残留检测前样品预处理用的分子印迹固相萃取柱，属于兽药残留检测技术领域。[0002]背景技术[0003]食品安全问题是关乎人类身体健康和社会和谐的重大问题，由于近些年来食品安全事件的频发，引起了世界各国对食品安全的高度关注。发达国家从上个世纪70年代起就开始关注兽药残留问题。目前，欧美等国家己经建立了完善的兽药残留监控体系，并且不断研究开发高效快速的检测方法，严格有关兽药残留法律法规，在此基础上设置药残技术性贸易壁垒，以此来阻碍其他国家的动物性食品的进入。2002年，我国农业部重新修订发布兽药在动物性食品中的最高残留限量，使规定限量的兽药达到134种，主要是抗生素类药物。但是此项工作在我国仍然尚属起步阶段，相应的配套法规还不够健全，检测方法及标准尚待完善，检测监控体系、执法体系和资金来源以及舆论宣传等