脂肪原始间充质干细胞的分离方法.pdf
雨巷****彦峰
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脂肪原始间充质干细胞的分离方法.pdf
本发明公开了一种脂肪原始间充质干细胞的分离方法,采用P型胶原酶消化脂肪组织,离心后获得脂肪间充质干细胞。P型胶原酶(collagenageP)使脂肪组织消化更彻底,组织消化均一,没有明显的组织残留,得到的间充质干细胞活性好,贴壁快,均一性好。
间充质干细胞的分离方法.pdf
本申请提供了一种间充质干细胞的分离方法,包括如下步骤:取完整的人源胎盘组织,从所述胎盘组织的脐静脉灌入清洗灌注液直至流出胎盘组织的清洗灌注液呈无色;将所述胎盘组织封闭处理以使所述胎盘组织内部形成不渗漏的灌注空间,从所述胎盘组织的脐静脉灌入酶灌注液进行消化;收集并培养所述酶灌注液中包含间充质干细胞的第一目标细胞;将所述第一目标细胞培养至对数生长期,保留1/3的所述第一目标细胞的游离细胞进行传代培养,以扩增所述间充质干细胞。本申请能够大大提高间充质干细胞的分离产量。
脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法.pdf
本发明属于干细胞技术领域,具体涉及一种脂肪间充质干细胞冻存液以及脂肪间充质干细胞冻存方法。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液,包括如下组分及其重量份数组成:基础培养基80~120份、低温保护剂5~10份,L‑岩藻糖2~6份,硫辛酸1~5份,还原型谷胱甘肽0.1~2份。本发明提供的脂肪间充质干细胞冻存液不含有动物血清,安全性高,成本低,且制备方法简单,与常规的冻存方法相比,采用本发明脂肪间充质干细胞的冻存方法冻存的细胞可明显减少冻存液对细胞的损伤,复苏后细胞回收率高。
脂肪间充质干细胞的制备方法.pdf
本发明提供一种脂肪间充质干细胞的制备方法,涉及干细胞与再生医学领域。该脂肪间充质干细胞的制备方法,包括以下步骤:脂肪组织预处理:用组织清洗液将采集的脂肪组织清洗至无血液残留,将清洗后的脂肪组织剪碎,得到脂肪微粒;消化:向脂肪微粒中加入脂肪组织消化液进行第一次消化,加入胰蛋白酶进行第二次消化,第二次消化后离心,去除上清液收集沉淀;其中,所述脂肪组织消化液包括DNA酶、I型胶原酶和Ⅲ型胶原酶;清洗:将沉淀清洗干净,筛去组织块,离心得到脂肪间充质干细胞。本发明的方法得到的脂肪间充质干细胞的数量多、纯度高、活性好
脂肪间充质干细胞的培养方法.pdf
本发明提供了一种脂肪间充质干细胞的培养方法。本发明脂肪间充质干细胞培养方法包括如下培养步骤:将获取的原代脂肪间充质干细胞接种至干细胞培养基中进行培养处理,其中,所述干细胞培养基中含有干细胞因子和白介素3因子,且所述干细胞因子与白介素3因子的含量比为(5‑20μmol/L):(5‑20ug/ml)。本发明培养方法能够提高脂肪间充质干细胞的扩增能力,并获得较高的迁移能力。