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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106366198A(43)申请公布日2017.02.01(21)申请号201610787087.0(22)申请日2016.08.31(71)申请人上海美吉生物医药科技有限公司地址201321上海市浦东新区国际医学园区康新公路3399弄3号楼(72)发明人蔡红东刘关陈昌岳张祥林(51)Int.Cl.C07K17/14(2006.01)C07K17/08(2006.01)C12N5/09(2010.01)B01J13/02(2006.01)H01F1/11(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图3页(54)发明名称一种免疫磁珠及其制备方法(57)摘要本发明提供了一种免疫磁珠及其制备方法,包括磁性微球部分和生物配基部分,所述免疫磁珠的结构式为:A-NH-N=CH-B,其中A表示磁性微球,B表示生物配基,或者A表示生物配基,B表示磁性微球。本发明的免疫磁珠性质稳定,而且磁性好,磁性微球与生物配基进行化学偶联,反应具有高度特异性,避免了内部交联,偶联效率高。同时,本发明的制备方法简单,反应条件温和,使生物配基可以保留生物活性。本发明原料简单易得,成本低,工艺步骤简单,具有很强的实用性。CN106366198ACN106366198A权利要求书1/1页1.一种免疫磁珠,包括磁性微球部分和生物配基部分,其特征在于:所述免疫磁珠的结构式为:A-NH-N=CH-B,其中A表示磁性微球,B表示生物配基,或者A表示生物配基,B表示磁性微球。2.根据权利要求1所述的免疫磁珠,其特征在于:所述生物配基为BSA、酶、抗体、DNA或RNA中的一种。3.根据权利要求1所述的免疫磁珠,其特征在于:所述磁性微球部分为核壳结构的无机或有机高分子包裹的磁性微球。4.一种制备权利要求1-3中任一项所述免疫磁珠的方法,其步骤包括:s1.磁性纳米簇的制备;s2.氨基修饰的磁性微球的制备;s3肼基修饰的A部分的制备;s4.醛基修饰的B部分的制备;s5.免疫磁珠的制备:将步骤s3所述肼基修饰的A部分与步骤s4所述醛基修饰的B部分混合,在4~25℃下进行偶联反应2~24小时,得到所述免疫磁珠。5.根据权利要求4所述免疫磁珠的制备方法,其特征在于:所述步骤s3中的肼基修饰的A部分是通过:将氨基修饰的磁性微球或生物配基用摩尔当量为10~50倍的SANH进行肼基修饰后得到的。6.根据权利要求4所述免疫磁珠的制备方法,其特征在于:所述步骤s4中的醛基修饰的B部分是通过:将氨基修饰的磁性微球或生物配基用摩尔当量为5~20倍的SFB进行醛基修饰后得到的。7.根据权利要求4所述免疫磁珠的制备方法,其特征在于:所述步骤s1中的磁性纳米簇是通过水热法、溶剂热法或共沉淀法制备得到。8.根据权利要求4所述免疫磁珠的制备方法,其特征在于:所述步骤s2中的氨基修饰的磁性微球为核壳结构的二氧化硅包裹的磁性微球,通过如下方法制备得到:向含有磁性纳米簇的溶液中加入氨水、硅烷化试剂和氨基硅烷偶联剂,反应1~3天后得到氨基修饰的磁性微球;所述磁性纳米簇、氨水、硅烷化试剂、氨基硅烷偶联剂加入的质量比为:1:(12.5~40):(2~8):(0.5~3)。9.根据权利要求4所述免疫磁珠的制备方法,其特征在于:所述步骤s5中,磁性微球和生物配基的质量比为1:(0.01~1)。10.一种权利要求1所述免疫磁珠在细胞分选中的应用。2CN106366198A说明书1/5页一种免疫磁珠及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及免疫磁珠的制备领域,具体地说是一种免疫磁珠及其制备方法。背景技术[0002]免疫磁珠(Immonumagneticbeads,简称IMB),是由磁性微球和生物配基结合而成。磁性微球与生物配基的结合一般有物理吸附和化学偶联的方法。物理吸附法由于制备得到的免疫磁珠保存时间短、磁性微球表面活性物质易脱落、蛋白稳定性和活性不佳等缺点,应用受到了限制。化学偶联是利用磁性微球表面的活性基团与生物配基的活性基团进行共价偶联,在磁性微球表面包被生物配基。化学偶联法具有结合容量大的优点,并且生物配基和磁性微球之间多了一层化学键空间臂,对生物配基的活性保护较好,可以避免蛋白质失活,稳定性好,制备得到的免疫磁珠通常可以保存数月。但是化学偶联法只能使用比较温和的条件,因此,抗体的包被效率不佳。化学偶联法是通过以下方法实现的:将磁性微球表面修饰上活性基团,如氨基(-NH2)、羧基(-COOH)或环氧基等,可将这些活性基团与生物配基中相应的,如氨基、羧基等活性基团偶联。[0003]其中,氨基修饰的磁性微球由于容易获得,且氨基的活性较好,很容易与生物配基进行化学偶联,被广泛使用。在使用时,一般将氨基修饰的磁性微球通过戊二醛与生物配基偶联,利用戊二醛作