一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106421075A(43)申请公布日2017.02.22(21)申请号201611103795.4A61P39/06(2006.01)(22)申请日2016.12.05A61P3/06(2006.01)(71)申请人山东省科学院生物研究所地址250000山东省济南市历下区科院路19号申请人山东格林康宝药业有限公司(72)发明人张姗姗王荣春何秋霞韩利文刘可春王莹韩拥政王希敏李晓彬张轩铭侯海荣郭敬兰王雪王丽娟(74)专利代理机构济南诚智商标专利事务所有限公司37105代理人朱彩霞(51)Int.Cl.A61K36/76(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图1页(54)发明名称一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法和应用(57)摘要本发明提供一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法和应用，以竹柳皮为原料，用5至20倍70％乙醇超声提取1～5次，每次30-120min，得提取液；将提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入蒸馏水溶解，先后用乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，正丁醇萃取液经减压浓缩干燥，得到粗提物粉末，经纯化后既得竹柳抗氧化活性组分。该活性组分对ABTS+·自由基和DPPH·自由基有很强的清除作用，且能提高小鼠组织中的超氧化歧化酶(SOD)的活性，抑制自由基损伤，防止脂质过氧化。通过人体试验表明该活性组分可以直接作为单方制剂用于因人体内自由基过多而产生的疾病的治疗，如高血脂的治疗。本发明成功从竹柳中提取到抗氧化活性组分，为竹柳在医药产品领域中的应用奠定基础。CN106421075ACN106421075A权利要求书1/1页1.一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法，其特征是，将竹柳皮粉末，用5至20倍70％乙醇超声提取1～5次，每次30-120min，得提取液；将提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入蒸馏水溶解，先后用乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，正丁醇萃取液经减压浓缩干燥，得到粗提物粉末，经纯化后既得竹柳抗氧化活性组分。2.如权利要求1所述的竹柳抗氧化活性组分的制备方法，其特征是，包括以下步骤：A)提取：竹柳皮粉末，粒度10～40目，按照料液比1:5～1:20加入70％乙醇溶液，超声提取条件为，频率9～18KHz，温度20～50℃，时间30～120min，超声次数1～5次，获得提取液；提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入适量蒸馏水复溶，用相同体积乙酸乙酯萃取至有机层无色，弃去乙酸乙酯层，加入与水层相同体积的水饱和正丁醇萃取至有机层无色，合并萃取液，减压浓缩至一定体积，真空干燥，得到粗提粉末；B)SephadexLH-20纯化：SephadexLH-20凝胶湿法装柱，径高比1:18，步骤A)所得粉末用少量95％乙醇溶液溶解，湿法上样，以95％乙醇溶液为洗脱剂，流速为0.4BV·h-1，等度洗脱3BV，收集2h后的洗脱液，HPLC检测，得到除去色素的具有抗氧化活性的竹柳正丁醇萃取物溶液；C)干燥及保存：步骤B)溶液减压浓缩至一定体积，真空干燥，经消毒、杀菌后，得到竹柳正丁醇萃取物粉末，即，竹柳抗氧化活性组分粉末。3.权利要求2所述的竹柳抗氧化活性组分的制备方法，其特征是，所述步骤A)竹柳皮粉末原料粒度为24目，料液比为1：10，超声频率18KHz，超声温度30℃，超声时间60min，超声次数3次。4.权利要求2所述的竹柳抗氧化活性组分的制备方法，其特征是，所述步骤B)HPLC检测的色谱条件为0-20min，20-45％甲醇水，20-70min，45-80％甲醇水，70-80min，80-100％甲醇水，80-90min，100％甲醇，流速为1ml/min，检测波长为220nm，柱温：25℃，YMC-packODSA色谱柱250×4.6mm，5μm。5.含权利要求1-4任一所述的制备方法获得的竹柳抗氧化活性组分的制剂，其特征是，所述制剂由竹柳抗氧化活性组分和药学上可接受的载体或稀释剂组成。6.权利要求5所述的含竹柳抗氧化活性组分的制剂，其特征是，所述制剂为片剂、糖衣丸、胶囊、注射剂、溶液、乳液、油膏、乳膏、气雾剂或栓剂。7.权利要求5或6所述的制剂，在制备防治因人体内自由基过多而产生的疾病的药物中的应用。8.权利要求7所述的应用，其特征是，所述疾病为高血脂。2CN106421075A说明书1/7页一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及竹一种竹柳抗氧化活性组分的制备方法和应用，该提取物分离自竹柳皮正丁醇部位，具有抗氧化活性，属于天然产物有效成分的提取、分离纯化领域。背景技术[0002]竹柳(Salixssp.)又称美国竹柳，为杨柳科(Saliaceae)柳属(Salix)植物，是美国寒柳、朝鲜柳和筐柳杂交的优良品系(王子成，2008)，其在继承传统柳属植物众