一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106421076A(43)申请公布日2017.02.22(21)申请号201611103837.4A61P29/00(2006.01)(22)申请日2016.12.05A61P17/06(2006.01)(71)申请人山东省科学院生物研究所地址250000山东省济南市历下区科院路19号申请人山东格林康宝药业有限公司(72)发明人韩利文张姗姗何秋霞刘可春王莹李晓彬张轩铭韩拥政侯海荣王希敏王雪郭敬兰王丽娟(74)专利代理机构济南诚智商标专利事务所有限公司37105代理人朱彩霞(51)Int.Cl.A61K36/76(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图2页(54)发明名称一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法和应用(57)摘要本发明提供一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法和应用，以竹柳皮为原料，以乙醇为溶剂，采用超声波技术进行提取，提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入适量蒸馏水溶解，乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩至一定体积，真空干燥，随后采用减压硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱进行纯化，得到竹柳乙酸乙酯提取物。实验表明竹柳乙酸乙酯提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀、大鼠棉球肉芽肿慢性炎症以及小鼠醋酸扭体均有较好的抑制活性，其可以直接作为单方制剂或是与其他组分复配用于急、慢性炎性疾病，特别是由慢性炎症导致的银屑病的治疗。本发明成功从竹柳中提取到抗炎活性组分，为竹柳在医药产品领域中的应用奠定基础。CN106421076ACN106421076A权利要求书1/1页1.一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法，其特征是，将竹柳皮粉末，用5至20倍乙醇超声提取1～5次，每次30-120min，得提取液；将提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入蒸馏水溶解，用乙酸乙酯萃取，经两次纯化后既得。2.如权利要求1所述的竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法，其特征是，具体步骤如下：A)提取：竹柳皮粉末，粒度10～40目，按照料液比1:5～1:20加入乙醇溶液，超声提取条件为，频率9～18KHz，温度20～50℃，时间30～120min，超声次数1～5次，获得提取液；提取液减压浓缩至无乙醇残留，加入适量蒸馏水溶解，用1～3倍量乙酸乙酯萃取1～3次，萃取液减压浓缩，真空干燥得到粗提物粉末；B)减压硅胶柱层析：100～300目硅胶湿法装柱，径高比1:5，步骤A)所得粉末干法上样，以石油醚为洗脱剂，除去低极性杂质；以石油醚和乙酸乙酯体积比为2:8的混合液为洗脱剂，洗脱液减压浓缩至一定体积，真空干燥，得到初次纯化的竹柳皮抗炎活性提取物粉末；C)SephadexLH-20纯化：凝胶柱径高比1:18，步骤B)所得粉末用少量氯仿-甲醇混合液溶解，湿法上样，以氯仿-甲醇1:1为洗脱剂，流速为0.3～0.5BV·h-1，等度洗脱，得到竹柳皮活性提取物溶液；D)干燥及保存：步骤C)的溶液减压浓缩至一定体积，真空干燥，经消毒、杀菌后，得竹柳皮活性提取物粉末。3.权利要求2所述的竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法，其特征是，所述步骤A)中乙醇溶液的体积分数为70％，原料粒度为24目，料液比为1：10，超声频率18KHz，超声温度30℃，超声时间60min，超声次数3次；乙酸乙酯的用量与溶解提取物所用蒸馏水的用量相同，萃取3次。4.权利要求2所述的竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法，其特征是，所述步骤B)中硅胶粒度为200～300目；以石油醚为洗脱剂洗脱2BV，以体积比为2:8的石油醚和乙酸乙酯混合液为洗脱剂洗脱3BV，合并洗脱液，于40℃条件下减压浓缩。5.权利要求2所述的竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法，其特征是，所述步骤C)湿法上样的样品浓度为50mg/mL，流速为0.4BV·h-1，洗脱3BV，收集2h后的洗脱液。6.含权利要求1-4任一所述的竹柳皮抗炎活性提取物的制剂，其特征是，所述制剂为由竹柳皮抗炎活性提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。7.权利要求6所述的含竹柳皮抗炎活性提取物的制剂，其特征是，所述制剂为片剂、糖衣丸、胶囊、注射剂、溶液、乳液、油膏、乳膏、气雾剂或栓剂。8.权利要求6或7所述的含有竹柳皮抗炎活性提取物的制剂，在制备防治银屑病的药物中的应用。2CN106421076A说明书1/8页一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种竹柳皮抗炎活性提取物的制备方法和应用，该提取物分离自竹柳皮乙酸乙酯部位，具有抗炎镇痛活性，属于天然产物有效成分的提取、分离纯化领域。背景技术[0002]竹柳(Salixssp.)又称美国竹柳，为杨柳科(Saliaceae)柳属(Salix)植物，是美国寒柳、朝鲜柳和筐柳杂交的优良品系(王子成，2008)，其在继承传统柳属植物众多的优良品性的同时表现