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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106676155A(43)申请公布日2017.05.17(21)申请号201710015540.0(22)申请日2017.01.10(71)申请人大连工业大学地址116000辽宁省大连市甘井子区轻工苑一号海洋楼(72)发明人杜明冯立婷涂茂林樊凤娇陈慧王震宇秦磊(74)专利代理机构大连科技专利代理有限责任公司21119代理人佟蕊(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)A23L33/18(2016.01)A61K38/01(2006.01)A61P7/02(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法(57)摘要本发明公开了一种具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,最大程度的保留贻贝中的抗凝血肽,并将其浓缩富集。本发明旨在选用不同种类的蛋白酶水解食源性的贻贝蛋白,即采用定向酶水解技术,制备具有抗凝血活性的多肽粉末,并对活性肽进行提纯浓缩,该法条件温和,成本低,副产物少,活性高。相对于化学合成或其他来源的抗凝血药物,该产品消化吸收性强,不会对人体产生副作用,对凝血有较强的预防作用。CN106676155ACN106676155A权利要求书1/1页1.一种具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,新鲜贻贝冲洗去杂及盐分;去壳匀浆得到匀浆液;选用胰蛋白酶、中性蛋白酶分别对贻贝匀浆液进行酶解;将酶解液加热使酶失活冷却后离心得酶解多肽上清液,采用滤膜对酶解液进行膜截留;采用喷雾干燥或者冷冻干燥得到多肽粉。2.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,所述的匀浆是:贻贝去壳后贝肉剪碎,加3-10倍体积去离子水混匀后用匀浆机进行匀浆处理,匀浆机的转速5000-8000rpm,时间5-10min。3.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,酶解过程中以0.5mo1/LNaOH溶液调节体系pH值。4.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,酶解条件如下表:酶种类温度/℃pH酶解时间/min加酶量/(u/g)胰蛋白酶25-557.0~9.020-1801000~5000中性蛋白酶30-506.5~8.520-1801000~5000。5.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,酶解液置于95-100℃水浴锅中加热8-15min使酶失活,待冷却至室温后离心,离心机转速5000-10000rpm,时间10-30min。6.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,采用1000-3000Da的滤膜对酶解液进行膜截留,保留流出液部分。7.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,喷雾干燥进风温度为138℃-146℃,出风温度为75℃-85℃,喷雾干燥处理后送入多级旋风分离器进行气粉分离,在恒温干燥室内收集多肽粉末。8.根据权利要求7所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,在喷雾干燥前进行蒸发浓缩,使固形物在20%-45%,在进行喷雾干燥。9.根据权利要求1所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,冷冻干燥,浆料厚度为3mm-7mm,工艺条件为:工作压力35-80Pa、冷冻温度-10℃--30℃、冷冻时间5h-12h、升华温度10-50℃、解析温度10-50℃,制得干燥物,将干燥物用真空冷冻干燥粉碎机进行粉碎,过60目-80目筛,得到多肽粉。10.根据权利要求8所述的具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法,其特征在于,蒸发浓缩采用单效蒸发或者多效蒸发。2CN106676155A说明书1/6页一种具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种具有抗血栓活性的贻贝多肽的制备方法。背景技术[0002]海洋生物资源丰富、种类繁多、生物链健全及再生能力强,海洋生物约占全球生物总量的一半。多变的生活环境、漫长的进化历程使这些生物具有与陆生生物不同的生理性状,并产生许多结构新颖、作用特殊的生物活性物质,是新型生物活性物的巨大来源,具有很大的开发潜力。生物活性肽是指具有优化机体代谢环境、有益于机体健康的一类多肽。一般由蛋白质酶解制得,通常含有3-20个氨基酸残基,它在原蛋白质序列上没有生物活性,但是通过酸、碱或酶水解释放后具有生物活性,其活性取决于它们的氨基酸组成及其排列顺序。海洋生物是开发生物活性肽的良好资源,近年来人们已从海洋生物、海洋加工的副产物中提取出许多不同种类的生物活性肽。随着消费者在饮食与健康方面意识的提高,对功能性食品成分和保健营养品的认知和需求也逐渐增加,来源于海洋生物和海洋加工副产物的生物活性肽,因为其具