一种纳米化疗药物载体的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108904802A(43)申请公布日2018.11.30(21)申请号201810811174.4A61K31/704(2006.01)(22)申请日2018.07.23A61P35/00(2006.01)B82Y5/00(2011.01)(71)申请人湖北大学B82Y15/00(2011.01)地址430062湖北省武汉市武昌区友谊大B82Y20/00(2011.01)道368号B82Y25/00(2011.01)申请人华中科技大学同济医学院附属协和医院(72)发明人易昌凤喻一鸣杨盛力(74)专利代理机构武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙)42231代理人黄君军(51)Int.Cl.A61K41/00(2006.01)A61K49/18(2006.01)A61K47/69(2017.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种纳米化疗药物载体的制备方法(57)摘要本发明公开了一种纳米化疗药物载体的制备方法，首先合成锰掺杂普鲁士蓝纳米粒子和锰掺杂普鲁士蓝@聚吡咯纳米粒子，然后称取上述两种纳米粒子4mg溶于4mlPBS缓冲溶液中，搅拌制成均匀溶液；称取1mg盐酸阿霉素(DOX)溶于1mlPBS溶液中，在避光条件下滴加入纳米粒子溶液中，滴加完毕后称取75mg透明质酸钠加到溶液中，低速搅拌24h；随后选用截留分子量为14KD的透析袋避光透析24h，得到最终产物，并放入4℃冰箱避光保存，制备具有MRI,PTT功能的纳米化疗药物载体来装载化疗药物，实现诊断治疗一体化功能纳米粒子具有重要的意义。CN108904802ACN108904802A权利要求书1/1页1.一种纳米化疗药物载体的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：步骤一：合成锰掺杂普鲁士蓝纳米粒子，首先称取422mg三水合六氰合铁(Ⅱ)酸钾和500mg聚乙烯吡咯烷酮溶于20ml去离子水中，常温下剧烈搅拌得到澄清透明溶液A；然后另称取189mg六水三氯化铁、37mg四水合氯化锰和500mg聚乙烯吡咯烷酮溶于20ml去离子水中，并在60℃水浴下快速搅拌得到澄清透明溶液B；之后，将A溶液缓慢滴加到B溶液中，同时剧烈搅拌，在A溶液滴加完毕后，并在60℃水浴环境中剧烈搅拌混合溶液使之继续反应1h；最后，15000rmp离心分离反应产物，除去上层清液，用乙醇洗涤离心沉淀3次，将离心后产物溶于去离子水中，冻干得到锰掺杂普鲁士蓝纳米粒子；步骤二：合成锰掺杂普鲁士蓝@聚吡咯纳米粒子，称取10mg锰掺杂普鲁士蓝纳米粒子分散于30ml去离子水中，加入75mg透明质酸钠和40mg十二烷基硫酸钠，搅拌直到得到澄清透明溶液；将溶液置于4-5℃冰水浴中，加入20μl吡咯单体，继续搅拌2h后将20mg六水三氯化铁溶于5ml去离子水中形成均匀六水三氯化铁溶液，缓慢匀速滴加到混合溶液中，避光环境下反应12h，15000rmp离心分离反应产物，除去上层清液，用水洗涤离心沉淀3次，将离心后产物溶于去离子水中，冻干得到锰掺杂普鲁士蓝@聚吡咯纳米粒子。步骤三：合成锰掺杂普鲁士蓝@聚吡咯纳米载药平台：称取上述两种纳米粒子4mg溶于4mlPBS缓冲溶液中，搅拌制成均匀溶液；称取1mg盐酸阿霉素(DOX)溶于1mlPBS溶液中，在避光条件下滴加入纳米粒子溶液中，滴加完毕后称取75mg透明质酸钠加到溶液中，低速搅拌24h；随后选用截留分子量为14KD的透析袋避光透析24h，得到最终产物，并放入4℃冰箱避光保存。2CN108904802A说明书1/4页一种纳米化疗药物载体的制备方法技术领域[0001]本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种有H2O2响应释药/PTT/MRI功能的纳米化疗药物载体的制备方法。背景技术[0002]恶性肿瘤是影响人类健康最严重的疾病之一，目前用于临床治疗恶性肿瘤的方式只有手术、放疗、化疗三种方法，而这些方法存在很多弊端，为提高肿瘤患者生存质量，近年来无创/微创肿瘤治疗新技术研究成为国内外备受关注的研究课题。[0003]纳米药物治疗效率与纳米药物所处的肿瘤细胞内外环境有着密切关系，肿瘤微环境不仅包括肿瘤所在组织的结构、功能和代谢，而且亦与肿瘤细胞自身的(核和胞质)内在环境有关，研究具有肿瘤微环境响应性能的纳米药物可以增强纳米药物的靶向性，提高纳米药物治疗肿瘤的精确性，对实现肿瘤纳米医疗“智能化”具有重大意义。光热治疗(PTT)是一种无创的肿瘤治疗技术，该技术以其定位准确，毒副作用小，治疗效果显著而逐渐成为肿瘤治疗技术中的热点。通过静脉注射具有较高光热转换效率的纳米粒子，然后于病患部位集中照射红外光，使得肿瘤局部区域温度高于45℃，从而对肿瘤细胞直接造成不可逆转的热损伤，近年来，有机聚合物聚吡咯因为有良好的光热性