一种核酸纳米药物载体及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114177312A(43)申请公布日2022.03.15(21)申请号202111531804.0A61K47/26(2006.01)(22)申请日2021.12.14A61P35/00(2006.01)B82Y5/00(2011.01)(71)申请人国家纳米科学中心地址100190北京市海淀区中关村北一条11号(72)发明人丁宝全王一鸣蒋乔(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332代理人王艳斋(51)Int.Cl.A61K47/69(2017.01)A61K47/54(2017.01)A61K47/62(2017.01)A61K31/337(2006.01)A61K31/4745(2006.01)权利要求书2页说明书19页附图4页(54)发明名称一种核酸纳米药物载体及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供一种核酸纳米药物载体及其制备方法和应用。所述核酸纳米药物载体包括DNA折纸纳米结构、胆固醇‑二硫键‑DNA复合物、肿瘤靶向肽‑DNA复合物和药物，且所述折纸结构中含有修饰有二硫键的响应元件DNA分子锁。本发明提供的核酸纳米药物载体可以将化疗药物靶向递送至肿瘤部位，响应肿瘤环境打开载体释放化疗药物，降低化疗药物对正常组织器官的毒副作用，并引发肿瘤细胞免疫原性细胞死亡，激活抗肿瘤免疫。与免疫检查点抗体联合使用，达到更好治疗肿瘤的目的。CN114177312ACN114177312A权利要求书1/2页1.一种核酸纳米药物载体，其特征在于，所述核酸纳米药物载体包括DNA折纸纳米结构、胆固醇‑二硫键‑DNA复合物、肿瘤靶向肽‑DNA复合物和药物，且所述折纸结构中含有修饰有二硫键的响应元件DNA分子锁。2.根据权利要求1所述的核酸纳米药物载体，其特征在于，所述核酸纳米药物载体的结构为三维管状纳米结构，且所述三维管状纳米结构为添加修饰有二硫键的响应元件DNA分子锁形成的；优选地，所述三维管状纳米结构包括矩形管状纳米结构、圆筒管状纳米结构或六边形管状纳米结构中的任意一种或至少两种，优选为矩形管状纳米结构；优选地，所述三维管状纳米结构为矩形管状纳米结构，所述三维管状纳米结构的长度为80‑100nm，宽度为20‑40nm，高度为3‑5nm；优选地，所述DNA折纸纳米结构由DNA模板链、订书钉DNA短链和捕获DNA链依据碱基互补配对原则杂交自组装而成的纳米结构，优选为矩形纳米结构；优选地，所述核酸纳米药物载体由DNA模板链、订书钉DNA短链、捕获DNA链、含有修饰有二硫键的响应元件DNA分子锁依据碱基互补配对原则杂交自组装而成的三维管状纳米结构，优选为矩形三维管状纳米结构；优选地，所述DNA模板链为M13mp18噬菌体单链环状DNA。3.根据权利要求1或2所述的核酸纳米药物载体，其特征在于，所述胆固醇‑二硫键‑DNA复合物通过DNA分子杂交的方式装载于所述DNA折纸纳米结构的内部。4.根据权利要求1‑3中任一项所述的核酸纳米药物载体，其特征在于，所述肿瘤靶向肽‑DNA复合物通过DNA分子杂交的方式装载于所述DNA折纸纳米结构的两端，优选装载于所述DNA折纸纳米结构的两个短边；优选地，所述肿瘤靶向肽选自RGD、TAT或GPR中的任意一种或至少两种的组合，优选为RGD；优选地，所述修饰有二硫键的响应元件DNA分子锁通过碱基互补配对原则杂交到所述DNA折纸纳米结构的两端，优选杂交到所述DNA折纸纳米结构的两个长边。5.根据权利要求1‑4中任一项所述的核酸纳米药物载体，其特征在于，所述药物为具有疏水性的药物，优选为具有疏水性的化疗药物；优选地，所述药物通过疏水作用力装载于所述DNA折纸纳米结构的内部；优选地，所述药物包括紫杉醇、喜树碱或多西他赛中的任意一种或至少两种的组合。6.根据权利要求1‑5中任一项所述的核酸纳米药物载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)通过碱基互补配对原则，将所述胆固醇‑二硫键‑DNA复合物和肿瘤靶向肽‑DNA复合物杂交到DNA折纸纳米结构上，组装得到靶向载疏水分子的DNA折纸结构；(2)将步骤(1)得到的靶向载疏水分子的DNA折纸结构和药物共孵育，得到载药物的DNA折纸结构；(3)通过碱基互补配对原则，将修饰有二硫键的DNA分子锁链杂交到所述DNA折纸纳米结构上，组装得到所述核酸纳米药物载体。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述胆固醇‑二硫键‑DNA复合物通过DNA分子杂交的方式装载于所述DNA折纸纳米结构的内部，所述肿瘤靶向肽‑DNA2CN114177312A权利要求书2/2页复合物通过DNA分子杂交的方式装载于所述DNA折纸纳米结构的两个短边；优选地，步骤(1)中，所述DNA折纸纳米结构