五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109001346A(43)申请公布日2018.12.14(21)申请号201811250114.6(22)申请日2018.10.25(71)申请人瑞阳制药有限公司地址256100山东省淄博市沂源县城瑞阳路1号(72)发明人苗得足胡清文焦启扬王娇曹桂东单纪苗相恒云曾丽丽(74)专利代理机构青岛发思特专利商标代理有限公司37212代理人马俊荣(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书12页附图2页(54)发明名称五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱(57)摘要本发明属于药品检测技术领域，具体的涉及一种五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。制备五味消毒饮制剂待测样品溶液，分别精密吸取待测样品溶液注入超高效液相色谱仪，记录指纹图谱，并将获得的指纹图谱积分信号导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次五味消毒饮制剂的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成五味消毒饮制剂的标准对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间。采用本发明所述的五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法建立的指纹图谱，能有效地表征五味消毒饮制剂的质量，有利于指导工作生产，全面监控药品质量。本发明方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。CN109001346ACN109001346A权利要求书1/2页1.一种五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：具体包括以下步骤：(1)待测样品溶液的制备提供不同批次的五味消毒饮颗粒剂样品，研细，分别取一定重量的五味消毒饮颗粒剂样品置于容器中，向容器中加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液并进行超声溶解，再加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜滤过，取滤液即得待测样品溶液；(2)参照物溶液的制备取紫草氰苷、格列风内酯、新绿原酸、绿原酸、秦皮乙素、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草苷和蒙花苷，加甲醇溶解，制成每1ml含各对照品10μg的溶液，作为参照物溶液；(3)分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入超高效液相色谱仪，记录60分钟内的指纹图谱，指纹图谱测定的色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温：25-35℃；流速：0.8-1.2ml/min；进样量为5-10μl；紫外检测波长：220-260nm；(4)将待测样品的指纹图谱积分信号导入中国药典委的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件；选择不同批次五味消毒饮制剂的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法计算相似度结果，并生成标准对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间以及各共有峰相对保留时间与参照峰相对保留时间的比值。2.根据权利要求1所述的五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤(1)的具体过程为：提供不同批次的五味消毒饮颗粒剂样品，研细，分别取3g五味消毒饮颗粒剂样品置于具塞锥形瓶中，加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，并进行超声处理，超声处理后，再加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜滤过，取滤液即得待测样品溶液。3.根据权利要求1所述的五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤(3)所述的色谱条件中流动相是以下(1)至(4)中的任意一种：(1)流动相A体积百分浓度0.2％甲酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(2)流动相A体积百分浓度0.1％磷酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(3)流动相A体积百分浓度0.2％醋酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(4)流动相A体积百分浓度0.1％三氟乙酸水溶液–流动相B甲醇水溶液。4.根据权利要求1所述的五味消毒饮制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤(3)所述的色谱条件中洗脱方式采用梯度洗脱，梯度洗脱的流程是以下(1)至(3)中的任意一种：(1)0～10min，体积百分浓度5-20％流动相B，10～20min，体积百分浓度20％流动相B，20～30min，体积百分浓度20％–35％流动相B，30～40min，体积百分浓度35％–45％流动相B，40～50min，体积百分浓度45-80％流动相B，50～51min，体积百分浓度80-5％流动相B，51～60min，体积百分浓度5％流动相B；(2)0～3min，体积百分浓度5％流动相B，3～10min，体积百分浓度5-20％流动相B，10～20min，体积百分浓度20％流动相B，20～30min，体积百分浓度20％–35％流动相B，30～40min，体积百分浓度35-45％流动相B，40～50min，体积百分浓度45-90％流动相B，50～2CN109001346A权利要