桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110487941A(43)申请公布日2019.11.22(21)申请号201910931400.7(22)申请日2019.09.29(71)申请人瑞阳制药有限公司地址256100山东省淄博市沂源县城瑞阳路1号(72)发明人苗得足胡清文艾玉焦启扬颜世利韩德凤曾丽丽(74)专利代理机构青岛发思特专利商标代理有限公司37212代理人马俊荣(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/74(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书2页说明书15页附图3页(54)发明名称桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱(57)摘要本发明属于药品检测技术领域，具体的涉及一种桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。制备桃红四物汤制剂待测样品溶液，分别精密吸取待测样品溶液注入高效液相色谱仪，记录指纹图谱，并将获得的指纹图谱积分信号导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次桃红四物汤制剂的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成桃红四物汤制剂的标准对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间。采用本发明所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法建立的指纹图谱，能有效地表征桃红四物汤制剂的质量，有利于指导工作生产，全面监控药品质量；本发明方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。CN110487941ACN110487941A权利要求书1/2页1.一种桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)待测样品溶液的制备取桃红四物汤制剂研细，加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液并进行超声溶解，再加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜滤过，取滤液即得待测样品溶液；(2)参照物溶液的制备取没食子酸、色氨酸、绿原酸、苦杏仁苷、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷和藁苯内酯，加甲醇溶解，制成每1ml含各对照品20μg的溶液，作为参照物溶液；(3)分别精密吸取参照物溶液和待测样品溶液各5-10μl，注入高效液相色谱仪，记录65-75分钟内的指纹图谱；(4)将待测样品的指纹图谱积分信号导入中国药典委的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件；选择不同批次桃红四物汤制剂的指纹图谱中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法计算相似度结果，并生成标准对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间以及各共有峰相对保留时间与参照峰相对保留时间的比值。2.根据权利要求1所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤(1)所述的待测样品溶液的制备是：取不同批次的桃红四物汤颗粒剂样品，研细，分别取0.8g桃红四物汤颗粒剂样品置于具塞锥形瓶中，加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，并进行超声处理，超声处理后，再加入体积百分浓度30％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，微孔滤膜滤过，取滤液即得待测样品溶液。3.根据权利要求1所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤(3)中所述的指纹图谱测定的色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温：25-35℃；流速：0.8-1.2ml/min；进样量为5-10μl；紫外检测波长：210-250nm。4.根据权利要求3所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：紫外检测波长为210nm、220nm或250nm中的一种。5.根据权利要求3所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：流动相是以下(1)、(2)、(3)或(4)中的任意一种：(1)流动相A体积百分浓度0.02％磷酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(2)流动相A体积百分浓度0.05％甲酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(3)流动相A体积百分浓度0.1％甲酸水溶液–流动相B甲醇水溶液；(4)流动相A体积百分浓度0.02％三氟乙酸水溶液–流动相B甲醇水溶液。6.根据权利要求3所述的桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于：洗脱方式采用梯度洗脱，梯度洗脱的流程是以下(1)、(2)或(3)中的任意一种：(1)0～5min，体积百分浓度2％流动相B，5～15min，体积百分浓度2％-20％流动相B，15～35min，体积百分浓度20％-28％流动相B，35～60min，体积百分浓度28％-80％流动相B，60～65min，体积百分浓度80％流动相B，65～66min，体积百分浓度80％-2％流动相B，66～2CN110487941A权利要求书2/2页75min，体积百分浓度2％流动相B；(2)0～5min，体积百分浓度3％流动相B，5～15min，体积百分浓度3％-16％流动相B，15～20min，体积百分浓度16％-25％流动相B，20