一种抗肿瘤多肽及其制备方法和用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110724179A(43)申请公布日2020.01.24(21)申请号201910970783.9(22)申请日2019.10.14(71)申请人陈勇地址710032陕西省西安市新城区长乐西路169号(72)发明人陈勇赵宁朱东烈(74)专利代理机构西安文盛专利代理有限公司61100代理人佘文英(51)Int.Cl.C07K7/06(2006.01)C07K7/08(2006.01)A61K38/10(2006.01)A61K38/08(2019.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页序列表1页附图4页(54)发明名称一种抗肿瘤多肽及其制备方法和用途(57)摘要本发明公开了一种抗肿瘤多肽及其制备方法和用途，筛选初始的多肽序列为：VLGLLAVVLVLVI。由于溶解性问题，进一步将初始13肽分成9肽(VL-9序列为：VLGLLAVVL)与4肽(序列为：VLVI)两部分，分别进行细胞功能学实验验证，结果发现9肽具有明显肿瘤抑制作用。本发明人发现将VL-9序列任意打乱之后得到的系列多肽，都保留较强的抑癌活性，且分别能够与人源性蛋白的片段相匹配，为了加强溶解性我们在9肽的两端各加上4个精氨酸而形成RR-17人源性抗肿瘤系列多肽，其中RR-171活性最为明显。本发明涉及的多肽是通过固相合成方法获得的。体内外药效学实验结果表明，本发明的多肽可显著抑制人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H的生长，具有潜在的抗肿瘤药物开发价值。CN110724179ACN110724179A权利要求书1/1页1.一种抗肿瘤多肽VL-9，其特征在于氨基酸序列如SEQID：No.1所示。2.一种抗肿瘤多肽RR-171，其特征在于氨基酸序列如SEQID：No.2所示。3.根据权利要求书2所述的一种抗肿瘤多肽RR-171，其特征在于该多肽为具有显著抑制肿瘤细胞活性的生物学效应多肽。4.根据权利要求书2所述的一种抗肿瘤多肽RR-171，其特征在于在制备抗肿瘤药物中的应用。5.根据权利要求书2所述的一种抗肿瘤多肽RR-171，其特征在于，包含与药学上可接受的载体、溶剂、稀释剂、赋形剂和其他介质混合的任一项的多肽或者其盐。2CN110724179A说明书1/4页一种抗肿瘤多肽及其制备方法和用途技术领域[0001]本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种多肽的筛选、合成及其应用，本发明的多肽具有抗肿瘤活性。背景技术[0002]癌症仍是威胁人类健康的重要因素，中国是癌症大国，发病人数和死亡人数均居世界第一。随着现代医学技术的进步，癌症的治疗已经有了飞跃式的发展，各类治疗方法和治疗药物层出不穷，但治疗效果仍不理想。癌症治疗的局面仍然非常复杂，其中癌症筛查、精准治疗以及老龄化是目前影响肿瘤治疗的主要三个方面。因此研发更为有效的肿瘤靶向治疗药物已成为当前研究的热点。[0003]近年来，许多科学家将抗癌药物的研究重点放在了不良反应少、活性高、不容易产生耐药的多肽药物上。多肽是化学与生物学交叉的一个领域，与生物的生长、代谢、免疫、疾病等密切相关，发挥重要的调控作用。多肽易于穿透细胞膜，分子量小、活性高，不易产生耐药性且易于改造，越来越受到人们的关注，在临床上的尝试和应用越来越广泛。但抗肿瘤肽(ACPs)也有不足之处，主要有两点，一是容易被血液中的一些蛋白酶水解或者被内皮系统吸收，导致稳定性差。二是多肽的选择性弱，容易对人体正常的活细胞会有一些毒副作用。药物的设计思路对ACPs的抗肿瘤活性、稳定性、选择性有重要影响。通过氨基酸序列的设计，可以筛选出抗肿瘤活性极好的多肽。[0004]抗肿瘤多肽来源十分广泛，主要有以下几种：1.天然产物肽：是指从昆虫、动物、植物、海洋生物和微生物等体内或其代谢产物中提取出来的生物活性多肽。如从萨氏海鞘得到抗肿瘤多肽CS5931，该多肽可以通过诱导结肠癌细胞CycC的释放，导致了caspases3和caspases9的活化，使结肠癌癌细胞亡。2.化学合成肽：利用化学合成技术，以氨基酸为原料合成多肽。化学合成多肽方法简单，产量较多。还能通过化学修饰的方法，提高其稳定性和可溶性，在抗肿瘤领域有很大的应用价值。固相合成法、液相合成法是化学合成多肽经常使用的两种方法。3.噬菌体肽库：噬菌体展示技术1985年Smith建立，在筛选功能性多肽有广泛的应用，可以筛选相关抗原，筛选靶向肽，研究疫苗，免疫诊断等。有人用细胞膜上可表达的KDR(血管内皮生长因子的受体)筛选噬茵体七肽库，并用化学方法合成短肽AATWLPPR。发明内容[0005]本发明的目的是提供一种抗肿瘤多肽及其制备方法和用途,本发明的多肽可显著抑制人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H的生长，具有潜在的抗肿瘤