一种蜚蠊多肽部位及其制备方法和用途.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115558690A(43)申请公布日2023.01.03(21)申请号202211005919.0A61K47/26(2006.01)(22)申请日2022.08.22A61K9/12(2006.01)A61K8/64(2006.01)(71)申请人南京中医药大学A61K8/04(2006.01)地址210023江苏省南京市栖霞区仙林大A61P1/00(2006.01)道138号A61P1/04(2006.01)(72)发明人陈志鹏刘衡吕廷梅吴丽A61P29/00(2006.01)陈瑞王宇彤徐柳李伟东A61P31/04(2006.01)(74)专利代理机构国浩律师(南京)事务所A61P39/06(2006.01)32284A61Q19/00(2006.01)专利代理师谭缙A61K35/64(2015.01)(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/14(2006.01)C07K1/34(2006.01)A61K38/01(2006.01)权利要求书2页说明书13页附图3页(54)发明名称一种蜚蠊多肽部位及其制备方法和用途(57)摘要本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种蜚蠊多肽部位及其制备方法和用途。本发明提供了一种从蜚蠊鲜品酶解产物中富集的分子量大于500道尔顿(>500Da)且小于10000道尔顿(<10KDa)的蜚蠊多肽有效部位，本发明的制备得到的蜚蠊多肽有效部位产品收率高、生物活性好，且便于操作、易于大规模生产操作。本发明还提供了一种蜚蠊多肽泡沫剂，该泡沫剂对溃疡性结肠炎具有显著的治疗效果。CN115558690ACN115558690A权利要求书1/2页1.一种分子量大于500道尔顿(>500Da)且小于10000道尔顿(<10KDa)的蜚蠊多肽有效部位，所述的蜚蠊多肽有效部位为蜚蠊鲜品酶解产物精制得到。2.权利要求1所述的蜚蠊多肽有效部位的提取方法，包括以下步骤：蜚蠊通过粉碎，用胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解，弃去上层油脂和下层沉淀，过滤，收集滤液即为蜚蠊鲜品酶解产物，滤液装入0.5KD的透析袋透析；透析结束后将袋内溶液用10KD超滤离心管离心，收集下层离心液，冷冻干燥，即得蜚蠊多肽有效部位。3.根据权利要求2的提取方法，其特征在于，所述蜚蠊鲜品酶解产物按如下方法制备：(1)将蜚蠊浸泡于清水中浸泡2h；(2)将步骤(1)的样品洗净残渣，滤干蜚蠊表面水分，加入1～5倍量纯水，粉碎成肉泥，备用；(3)将步骤(2)得到的肉泥与3～8倍0.1mol/L的盐酸水溶液混合后，加入0.5％～10％胃蛋白酶(m/V)，37℃保温条件下200rpm搅拌4h，粗滤，收集滤液；(4)将步骤(3)得到的滤液，10mM氢氧化钠溶液调节pH至7.4，加入0.5％～10％的胰蛋白酶(m/V)，37℃保温条件下200rpm搅拌2h，8000rpm4℃离心15min，弃去上层油脂和下层沉淀，0.45μm滤头过滤，收集滤液，即得蜚蠊鲜品酶解产物；优选的，所述步骤(1)中蜚蠊为新鲜活虫或新鲜虫体，更优选为新鲜活虫；优选的，所述步骤(2)中加入纯水的量为1～2倍，更有选为加入纯水的量为1倍；优选的，所述步骤(3)中蜚蠊肉泥与盐酸水溶液的质量比1∶(3～5)，更有选为1:5；优选的，所述步骤(3)中胃蛋白酶的比例为0.5％～3％，更优选为1.5％；优选的，所述步骤(3)酶解时间为2～6h；更优选为4h；优选的，所述步骤(4)中胰蛋白酶的比例为0.5％～3％，更优选为1％；优选的，所述步骤(4)酶解时间为1～4h；更优选为2h。4.根据权利要求2的提取方法，其特征在于，所述蜚蠊多肽有效部位提取方法如下：S1：将蜚蠊鲜品酶解产物装入0.5KD的透析袋，磁力搅拌300rpm，透析；S2：将所述步骤S1中透析袋内的溶液转移至10KDa的超滤离心管中，8000rpm条件下离心30min，收集下层离心液，冷冻干燥，即得蜚蠊多肽有效部位；优选的，所述步骤S1中溶液的透析次数为1～10次，单次透析时间为1～10h；更优选为透析次数为4次，单次透析时间为2h；优选的，所述步骤S2中超滤离心的温度为4～25℃，离心转速6000～12000rpm，离心时间15～60min；更优选地，超滤离心温度为4～8℃，离心转速8000～10000rpm，离心时间30～45min。5.一种由权利要求1所述的蜚蠊多肽有效部位制备而成的蜚蠊多肽泡沫剂，按重量份数计包括以下组分：0.3‑0.5份蜚蠊多肽有效部位，0.4～0.8份发泡剂、0.4～0.5份增溶剂、1～2份增稠剂、0.4～0.8份稳定剂、0.01～1份抑菌剂。6.根据权利要求5所述的蜚蠊多肽泡沫剂，其特征在于，所述发泡剂选自十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠