一种脱细胞小口径血管支架及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110732041A(43)申请公布日2020.01.31(21)申请号201910965864.X(22)申请日2019.10.12(71)申请人广东省人民医院(广东省医学科学院)地址510000广东省广州市越秀区中山二路106号(72)发明人林展翼梁远锋刘尚敏李东风姚博谦(74)专利代理机构广州微巨知识产权代理有限公司44594代理人刘彦(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图3页(54)发明名称一种脱细胞小口径血管支架及其制备方法(57)摘要本发明公开的一种脱细胞小口径血管支架，具有这样的特征：充分的去除了血管上的细胞及核物质等抗原成分，较大程度降低其免疫排斥反应，使其具有良好的顺应性；较好的保留了小口径血管的细胞外基质成分；维持了血管组织原有的胶原纤维、弹性纤维等结构蛋白的构象和空间结构分布，使其力学特性及力学强度与脱细胞前相似；脱除细胞后形成的微观孔隙材料其合适的纤维孔隙提供了天然微环境，有利于宿主细胞的黏附生长及增殖迁移，且无细胞毒性；脱细胞后对材料进行改性，降低血栓形成，提高小口径血管支架的远期通畅率。本发明获得的脱细胞小口径血管支架具有良好的修复、生长及重构的作用。CN110732041ACN110732041A权利要求书1/1页1.一种脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，获取小口径血管；将获取的小口径血管进行预处理，化学除垢剂处理，特殊的酶处理，漂洗处理，材料改性处理，整个操作处于无菌条件下进行。2.根据权利要求1所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述预处理步骤包括：剔除小口径血管周围的脂肪和结缔组织，并且不损伤血管外膜。3.根据权利要求1所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述化学除垢剂处理包括：将预处理后的小口径血管置于含有化学除垢剂的0.9％(v/v)生理盐水或PBS缓冲液中，在15-40℃恒温摇床上处理10-50h。4.根据权利要求3所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述化学除垢剂为CHAPS，或SDS，或TritonX-100、脱氧胆酸钠、胆酸钠、低渗/高渗Tris缓冲液、二巯基苏糖醇、聚乙二醇中的一种或两种及两种以上的联合。5.根据权利要求4所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述化学除垢剂处理包括：将预处理后的小口径血管置于CHAPS缓冲液或SDS缓冲液中，在15-40℃恒温摇床处理10-50h，所述的CHAPS缓冲液或所述的SDS缓冲液成分中还包括0.1-2mmol/LNaCl、5-50mmol/L乙二胺四乙酸及1％(v/v)青霉素和链霉素。6.根据权利要求1所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述特殊的酶处理包括：将处理后的小口径血管置于含有5％-30％(v/v)生物酶或人血清或相应动物血清的0.9％(v/v)生理盐水或0.01MPBS缓冲液中，0.9％(v/v)生理盐水或0.01MPBS缓冲液中还包括1％(v/v)的青霉素和链霉素，在25-40℃恒温摇床处理10-50h。7.根据权利要求1所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述漂洗处理包括：将处理后的小口径血管置于漂洗液中，所述漂洗液为0.9％(v/v)生理盐水或0.01MPBS缓冲液，在15-40℃恒温摇床处理5-15h，每1-2h更换漂洗液，摇晃速度均匀缓慢。8.根据权利要求1所述的脱细胞小口径血管支架的制备方法，其特征在于，所述的材料改性处理包含对脱细胞之后的小口径组织工程血管进行肝素接枝、内皮化修饰、基因修饰。9.由权利要求1至8任一所述的制备方法获取的脱细胞小口径血管支架。2CN110732041A说明书1/5页一种脱细胞小口径血管支架及其制备方法技术领域[0001]本发明属于组织工程管状材料领域，具体地，涉及一种脱细胞小口径血管支架的制备方法。背景技术[0002]血管疾病，尤其是动脉粥样硬化，是西方社会死亡率和发病率的主要原因之一，因此由合成聚合物包括多种人工材料包括涤纶(Dacron)和膨胀聚四氟乙烯(ePTFE)制成的血管移植物在大中口径血管(直径＞6mm)的移植中得到应用，但高血栓形成率及移植后低的远期通畅率限制了这些材料用作小口径人工血管。[0003]自体血管目前是血管旁路移植物材料的最佳选择，然而受限于自体可用血管的数量和血管病变进展，自身移植物的使用存在一些限制，包括来源、同质性、使用数量、使用长度、血管感染等难题。从再生医学的角度出发，自然衍生的生物材料形成的血管在未来小口径血管的应用中具有巨大潜能，其中包括了组织工程体外培养的血管、人源性血管及动物血管。[00