一种安眠酮抗原及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111363027A(43)申请公布日2020.07.03(21)申请号202010164001.5(22)申请日2020.03.10(71)申请人杭州隆基生物技术有限公司地址311100浙江省杭州市余杭区余杭街道义创路1号(72)发明人曾繁荣郑曙剑刘静(74)专利代理机构杭州永曙知识产权代理事务所(特殊普通合伙)33280代理人杨斌(51)Int.Cl.C07K14/765(2006.01)C07K14/77(2006.01)C07K14/795(2006.01)C07K1/113(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种安眠酮抗原及其制备方法(57)摘要本发明所要解决的技术问题是提供一种安眠酮抗原，还提供了制备该安眠酮抗原的方法，该方法包括以下步骤：以邻乙酰氨基苯甲酸和邻氨基苯甲酸为原料，通过缩合反应生成2-甲基-3-(2-甲基-3-羧基苯基)-4(3H)喹唑啉酮；将步骤a)得到的产物与甘氨酸乙酯盐酸盐缩合反应，得到2-(2-甲基-3-(2-甲基-4-(3H)喹唑啉酮基）苯甲酰胺基）乙酸乙酯；将步骤b)得到的产物水解，得到安眠酮半抗原；将步骤c)得到的产物与大分子蛋白偶联，得到安眠酮抗原。本发明整体的制备工艺条件温和，没有苛刻的反应条件，另外，在制备抗原的过程中最大程度的保留了安眠酮分子结构中的活性基团，所得抗原具有较强的特异性和较高的灵敏度。CN111363027ACN111363027A权利要求书1/1页1.一种安眠酮抗原，其结构式为：2.制备安眠酮抗原的方法，该方法包括以下步骤：a)以邻乙酰氨基苯甲酸和邻氨基苯甲酸为原料，通过缩合反应生成2-甲基-3-(2-甲基-3-羧基苯基)-4(3H)喹唑啉酮；b)将步骤a)得到的产物与甘氨酸乙酯盐酸盐缩合反应，得到2-(2-甲基-3-(2-甲基-4-(3H)喹唑啉酮基)苯甲酰胺基)乙酸乙酯；c)将步骤b)得到的产物水解，得到安眠酮半抗原；d)将步骤c)得到的产物与大分子蛋白偶联，得到安眠酮抗原。3.根据权利要求2所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于，步骤a)中，以邻乙酰氨基苯甲酸和邻氨基苯甲酸为原料，通过缩合反应生成2-甲基-3-(2-甲基－3－羧基苯基)-4(3H)喹唑啉酮；反应溶剂为N，N-二甲基甲酰胺或二甲基亚砜，反应温度为60-120℃，反应时间为4-24h。4.根据权利要求3所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于所述反应温度为90℃，反应时间为14h。5.根据权利要求2所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于，步骤b)中，将步骤a)得到的产物与甘氨酸乙酯盐酸盐缩合反应，得到2-(2-甲基-3-(2-甲基-4-(3H)喹唑啉酮基)苯甲酰胺基)乙酸乙酯；缩合试剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，反应溶剂为吡啶，反应温度为10-40℃，反应时间为10-30h。6.根据权利要求5所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于所述反应温度为25℃，反应时间为20h。7.根据权利要求2所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于，步骤c)中，将步骤b)得到的产物水解；水解所用试剂为氢氧化钠或氢氧化钾，反应溶剂为40％－60％乙醇水溶液，反应温度为20-40℃，反应时间为2-24h。8.根据权利要求7所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于所述反应溶剂为48％乙醇水溶液，反应温度为22℃，反应时间为10h。9.根据权利要求2所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于，步骤d)中，将步骤c)得到的半抗原与大分子蛋白偶联，得到安眠酮抗原；半抗原与大分子蛋白偶联的方法为二环己基碳二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺法。10.根据权利要求9所述的制备安眠酮抗原的方法，其特征在于，所述大分子蛋白质为BSA、KLH、OVA或BGG中的一种。2CN111363027A说明书1/7页一种安眠酮抗原及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及安眠酮抗原及安眠酮抗原的制备方法。背景技术[0002]安眠酮(Methaqualone)又名海米那，甲奎酮或眠可欣，学名“2-甲基-3-(2-甲基苯基)-4(3H)喹唑啉酮，其结构式如下：[0003][0004]安眠酮属于非巴比妥类中枢神经镇定药。在临床上安眠酮用于神经衰弱、失眠、麻醉前给药，常做为镇静和催眠药物。兽医临床主要用于动物过度兴奋或惊厥促使机体平静。长期服用该类药物会产生依赖性或成瘾性，已属国家管制类的精神药品。我国于1987年禁止了安眠酮的生产和流通(禁止生产安眠酮及制剂，1987)。2007年中华人民共和国第824号文件也明确规，国家管制的精神药品如安眠酮在动物性食品中的残留为零(农业部发布动物性食品中兽药最高残留限，2007)。[0005]安眠酮常用检测分析方法