一种负载生长因子的活性羊膜材料及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111450327A(43)申请公布日2020.07.28(21)申请号202010289786.9(22)申请日2020.04.14(71)申请人杭州卓泽医药科技有限公司地址310000浙江省杭州市上城区秋涛路178号5号楼一层51083(72)发明人王丽方袁进赵轩(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司44202代理人刘孟斌(51)Int.Cl.A61L31/16(2006.01)A61L31/14(2006.01)A61L31/00(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种负载生长因子的活性羊膜材料及其制备方法(57)摘要本发明提供了一种羊膜材料以及负载生长因子的活性羊膜材料的制备方法，本发明将羊膜洗净进行酶解消化，去除其表面杂质，然后将处理好的羊膜浸泡于甘油中，然后将羊膜材料置于肝素钠溶液中，加入交联剂进行交联，无菌水洗涤后，于恒温恒湿的无菌环境下晾干，即可获得所述羊膜材料；再将制备的羊膜材料浸泡于含有生长因子的溶液中，即得到负载生长因子的活性羊膜材料。本发明的羊膜材料保留羊膜的天然微观结构，透光性好；生物相容性良好，细胞可以在本材料上粘附、增殖；力学性能良好，不容易造成撕裂；可常温下长期保存，由于负载生长因子，可促进细胞迁移和分化，增强细胞间黏附，抑制细胞调亡等。CN111450327ACN111450327A权利要求书1/1页1.一种羊膜材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取羊膜，清洗羊膜，将羊膜进行酶解消化，去除其表面杂质，然后将处理好的羊膜浸泡于甘油中，静置过夜，备用；(2)将步骤(1)的羊膜材料置于肝素钠溶液中，然后加入交联剂进行交联，在4～6℃条件下，水浴锅中搅拌4～10小时；(3)取出经步骤(2)处理的羊膜材料，无菌水洗涤后，于恒温恒湿的无菌环境下晾干，即可获得本发明的羊膜材料。2.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：将由如权利要求1中步骤(3)制备的羊膜材料浸泡于含有生长因子的PBS溶液中2～8小时，即得到负载生长因子的活性羊膜材料。3.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中酶解消化采用的酶为胰蛋白酶，消化时间为3～5小时。4.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中肝素钠溶液中肝素钠的质量体积浓度为1～2mg/mL，pH值为5.0～5.5。5.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中交联剂为1-乙基-3(3-二甲基氨丙基)碳化二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺的混合物，其中1-乙基-3(3-二甲基氨丙基)碳化二亚胺与N-羟基丁二酰亚胺的质量比为(1～2):1。6.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中羊膜与1-乙基-3(3-二甲基氨丙基)碳化二亚胺的质量比为6:(1～2)。7.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中恒温恒湿环境的条件如下：温度为20～35℃、湿度为20～60％。8.如权利要求1所述的羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述生长因子包括表皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子、神经生长因子和肝细胞生长因子中任意一种或几种。9.一种由权利要求1所述的羊膜的制备方法制备而成的羊膜材料。10.一种由权利要求2所述的羊膜的制备方法制备而成的负载生长因子的活性羊膜材料。2CN111450327A说明书1/4页一种负载生长因子的活性羊膜材料及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物医药材料技术领域，具体涉及一种负载生长因子的活性羊膜材料及其制备方法。背景技术[0002]羊膜具有独特的理化性能与生物学特性，因此，羊膜在临床治疗中得到广泛的应用。作为覆盖材料或敷料时，羊膜有着抑制炎症、抗粘连、促进细胞分化与增殖、抑制瘢痕形成、抑制血管增生等作用，已经成为临床手术中常见的生物材料，如用于角膜及眼表损伤修复，皮肤烧伤及创伤的创面覆盖，外科腹腔手术、妇产科盆腔手术预防组织粘连，肌腱损伤、骨/软骨损伤的手术界面修复等。羊膜的诸多生物学功能是由于其含有多种细胞生长因子，如EGF、bFGF、KGF、HGF等。有众多研究表明，这些生长因子可促进细胞迁移和分化，增强细胞间黏附，抑制细胞调亡等。羊膜中除了含有多种细胞因子外还含有多种蛋白酶的抑制因子，这些因子通过抑制相应的蛋白酶而发挥抗炎作用。[0003]由于羊膜在使用前需要面临预处理，如细菌与病毒灭活等，以及未及时使用的存储与运输，羊膜上所带有的生长因子因此会随着处理工艺、保存方式和保存时间而降低，从而影响其使用时的疗效。如何改良羊膜的处理、保存方式以降低上述过程中的生长因子损耗或对损失的生长因