一种羊膜材料及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110772667A(43)申请公布日2020.02.11(21)申请号201911124394.0(22)申请日2019.11.15(71)申请人中山大学附属第一医院地址510000广东省广州市越秀区中山二路58号(72)发明人韩杨王冬昱王子莲(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限公司44202代理人颜希文(51)Int.Cl.A61L27/36(2006.01)A61L27/58(2006.01)A61L31/00(2006.01)A61L31/14(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种羊膜材料及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种羊膜材料及其制备方法，包括以下步骤：(1)取羊膜，使用无菌缓冲溶液清理表面残留的血液及污渍；(2)将步骤(1)清洗后的羊膜置于pH为6.9～7.4，含有质量百分比为0.5～5％的原花青素的交联缓冲溶液中进行交联；(3)用清洗缓冲液淋洗处理后的羊膜；(4)将淋洗后的羊膜裁剪为所属尺寸后进行冷冻干燥处理；(5)对干燥后的羊膜进行灭菌。本发明方法操作工艺简便，不需特殊仪器，便于规模化生产；通过使用原花青素进行交联并优化其使用条件，能有效克服使用化学交联剂处理带来的毒性问题，得到的羊膜材料保留良好组织相容性能和活性，更具有强度佳、保质期长等优点，具有重要的医用及经济价值。CN110772667ACN110772667A权利要求书1/1页1.一种羊膜材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取羊膜，使用无菌缓冲溶液清理羊膜表面残留的血液及污渍；(2)将步骤(1)清洗后的羊膜置于pH值为6.9～7.4，含有质量百分比为0.5～5％的原花青素的交联缓冲溶液中进行交联；(3)用清洗缓冲液淋洗处理后的羊膜；(4)将淋洗后的羊膜裁剪为所属尺寸后进行冷冻干燥处理；(5)对干燥后的羊膜进行灭菌。2.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述羊膜经健康人胎盘或动物胎盘剥离得到；所述胎盘为新鲜胎盘或经冷冻保藏后室温解冻后的胎盘，所述动物包括猪或牛。3.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述无菌缓冲液为PBS缓冲溶液。4.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述交联缓冲溶液含有质量百分比为0.5％的原花青素。5.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述交联缓冲溶液的pH值为7.4。6.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，步骤(2)中交联步骤为：4～45℃中恒温浸泡1min～72h。7.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述清洗缓冲液为无菌PBS溶液，或含有青霉素、链霉素、两性霉素中至少一种的无菌PBS溶液。8.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)的冷冻干燥过程为：温度为-40～0℃，气压为0.0001bar～800bar，处理10min～120h。9.如权利要求1所述羊膜材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)的灭菌处理为辐照灭菌；辐照源为高能电子加速器，辐照量为10～30kGy。10.如权利要求1～9任一项所述方法制得的羊膜材料。2CN110772667A说明书1/4页一种羊膜材料及其制备方法技术领域[0001]本发明属于生物材料技术领域，涉及一种羊膜材料；具体涉及一种羊膜材料及其制备方法。背景技术[0002]羊膜是一类无淋巴管神经及血管，无免疫原性的生物膜。羊膜具备显著的抗纤维化特性，对新生血管以及感染具有明显的抑制功能。羊膜富含IV、V型胶原、碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、转化生长因子-α(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)等，能显著促进上皮细胞的生长、增殖和分化，利于上皮类创伤的愈合。此外，羊膜富含蛋白抑制类生物因子，可以抑制胶原纤维过度增生，预防组织粘连。并且羊膜的来源途径广泛、包括人在内的胎生的哺乳动物生产时均具有胎盘，作为生产后的废弃物，胎盘(羊膜)的取材操作简洁且成本低，因此在眼表损伤修复、皮肤损伤/烧伤修复、肌腱重建、外科手术防黏连等领域具有极大应用前景。[0003]然而，目前临床使用的羊膜材料主要是从产妇资源捐献的胎盘剥离而来，一般是未经处理，质地较薄，机械强度较差，容易卷曲，易撕裂，临床使用操作不便利且短期内会溶解而失去功能，因此临床操作常采用缝合及多次/多层贴敷的方法以满足长时间使用的需求。为解决此问题，有研究及专利报道使用化学试剂，如戊二醛、甲醛等，对羊膜进行化学交联，虽然可以一定程度提升羊膜的力学强度，但化学交联试剂的残留会引起生物毒性，限制了其临床的使用。发明内容[0004]针对上述问题