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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112778404A(43)申请公布日2021.05.11(21)申请号202110117653.8C12N15/38(2006.01)(22)申请日2021.01.28A61K39/245(2006.01)A61P31/20(2006.01)(71)申请人中山大学A61K38/16(2006.01)地址510275广东省广州市海珠区新港西A61K47/62(2017.01)路135号A61P31/00(2006.01)申请人中山大学肿瘤防治中心(中山大学A61P35/00(2006.01)附属肿瘤医院、中山大学肿瘤研究A61P37/02(2006.01)所)A61P39/00(2006.01)(72)发明人曾木圣孙聪冯国开康银峰A61P25/00(2006.01)(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205代理人胡辉(51)Int.Cl.C07K14/03(2006.01)C07K19/00(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表23页附图4页(54)发明名称一种含EB病毒gHgL蛋白的自组装纳米颗粒及其制备方法与应用(57)摘要本发明公开了一种含EB病毒gHgL蛋白的自组装纳米颗粒及其制备方法与应用。该自组装纳米颗粒,包含第一多肽和第二多肽;所述第一多肽包含gHgL蛋白和第一载体亚基,所述第二多肽包含第二载体亚基;所述第一载体亚基为I53‑50A1,所述第二载体亚基为I53‑50B.4PT1;所述gHgL蛋白与第一载体亚基通过铰链连接。该自组装纳米颗粒首次将EB病毒的gHgL蛋白展示在纳米颗粒表面,其粒径较抗原(gHgL)大,具有更好的抗原驻留体积,热稳定与抗原(gHgL)相当,同时其展示的gHgL数量更多能够更强地刺激B细胞,并且能够诱导更高的抗体滴度,可用于预防EB病毒感染及治疗EB病毒感染所引起的疾病。CN112778404ACN112778404A权利要求书1/1页1.一种自组装纳米颗粒,其特征在于:包含第一多肽和第二多肽;所述第一多肽包含gHgL蛋白和第一载体亚基,所述第二多肽包含第二载体亚基;所述第一载体亚基为I53‑50A1,所述第二载体亚基为I53‑50B.4PT1;所述gHgL蛋白与第一载体亚基通过铰链连接。2.根据权利要求1所述的自组装纳米颗粒,其特征在于:所述I53‑50A1的氨基酸序列如SEQIDNO:26所示;所述I53‑50B.4PT1的氨基酸序列如SEQIDNO:27所示;优选的,所述铰链包含柔性序列和刚性接头;所述柔性序列为含5~9个氨基酸的多肽;所述刚性接头的氨基酸序列为EKAAKAEEAA。3.根据权利要求2所述的自组装纳米颗粒,其特征在于:所述第一多肽还包含稳定蛋白;所述稳定蛋白位于铰链与gHgL蛋白之间;优选的,所述稳定蛋白为T4噬菌体纤维蛋白原或GCN4肽段。4.根据权利要求3所述的自组装纳米颗粒,其特征在于:所述第一多肽为第一多肽三聚体,所述第二多肽为第二多肽五聚体。5.根据权利要求4所述的自组装纳米颗粒,其特征在于:所述第一多肽三聚体的拷贝数为18~22,所述第二多肽五聚体的拷贝数为10~14。6.根据权利要求1~5中任一项所述的自组装纳米颗粒,其特征在于:所述gHgL蛋白包含gH蛋白和gL蛋白;优选的,所述gHgL蛋白还包含链接序列。7.权利要求1~6中任一项所述的自组装纳米颗粒的制备方法,其特征在于:将第一多肽与第二多肽孵育,得到;优选的,所述第一多肽和第二多肽的摩尔比为1:(3~6)。8.权利要求1~6中任一项所述的自组装纳米颗粒在制备预防EB病毒感染的药品中的应用。9.一种疫苗,其特征在于:包含权利要求1~6中任一项所述的自组装纳米颗粒;所述疫苗优选还包括佐剂。10.权利要求1~6中任一项所述的自组装纳米颗粒在制备治疗EB病毒感染所引起的疾病的药品中的应用。2CN112778404A说明书1/9页一种含EB病毒gHgL蛋白的自组装纳米颗粒及其制备方法与应用技术领域[0001]本发明属于生物技术领域,具体涉及一种含EB病毒gHgL蛋白的自组装纳米颗粒及其制备方法与应用。背景技术[0002]EB病毒(Epstein‑Barrvirus,EBV)属于γ疱疹病毒,是一种带有包膜的双链DNA病毒,主要感染皮肤、黏膜、神经等外胚层来源的组织。它在人群中感染非常普遍,患病率高达95%,且极易在体内终生潜伏。除了引起传染性单核细胞增多症,EB病毒还可引起移植后淋巴细胞增殖性疾病和一些B细胞、上皮细胞的恶性肿瘤。淋巴细胞增殖性疾病包括Burkitt淋巴瘤、弥漫大B细胞性淋巴瘤、NK/T细胞淋巴瘤等;恶性肿瘤包括鼻咽癌、胃癌等。[0003]在EBV的融合蛋白复合体中,既包括在疱疹病毒家族保