一种自组装蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113332165A(43)申请公布日2021.09.03(21)申请号202110683000.6(22)申请日2021.06.18(71)申请人合肥工业大学地址230000安徽省合肥市屯溪路193号(72)发明人章宝李小龙刘文杰陈品王如梦(74)专利代理机构南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256代理人王锋(51)Int.Cl.A61K8/64(2006.01)A61Q19/00(2006.01)A61K47/42(2017.01)A61K9/51(2006.01)A23J3/14(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种自组装蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用(57)摘要本发明揭示了一种自组装蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。所述制备方法包括：使亚硫酸盐与豌豆蛋白混合，打破豌豆蛋白中的二硫键，暴露蛋白质的疏水性基团；加热所获混合液，使豌豆蛋白之间因疏水作用发生聚集，并重新形成二硫键，形成自组装豌豆蛋白纳米颗粒。本发明提供的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，操作简单，成本低，制备过程中未添加醇类等有机试剂；且制备的自组装蛋白纳米颗粒具有可控的粒径，较高的稳定性，良好的生物相容性等优点。CN113332165ACN113332165A权利要求书1/1页1.一种自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括：使亚硫酸盐与豌豆蛋白混合，打破豌豆蛋白中的二硫键，暴露蛋白质的疏水性基团；加热所获混合液，使豌豆蛋白之间因疏水作用发生聚集，并重新形成二硫键，形成自组装蛋白纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将豌豆分离蛋白与水充分混合，之后离心去除不溶性聚集体，得到可溶性的豌豆蛋白溶液；(2)将亚硫酸盐与步骤(1)所获豌豆蛋白溶液混合，并加热进行反应获得豌豆蛋白纳米颗粒分散液；(3)对步骤(2)所获豌豆蛋白纳米颗粒分散液进行透析处理获得自组装蛋白纳米颗粒。3.根据权利要求2所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(1)具体包括：将豌豆分离蛋白与水充分混合，于2‑8℃静置12‑36h，使豌豆蛋白充分水合，之后于4000‑8000rpm下离心20‑45min。4.根据权利要求2所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述豌豆蛋白溶液中豌豆蛋白的浓度为0.5‑15mg/mL。5.根据权利要求2所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(2)中具体包括：将亚硫酸盐溶液滴加至持续搅拌的豌豆蛋白溶液中，之后加热处理，冷却，调节pH值至6.5‑7.5，得到豌豆蛋白纳米颗粒分散液；优选的，所述亚硫酸盐包括焦亚硫酸钾、亚硫酸钠或亚硫酸氢钠中的至少一种，更为优选的，所述亚硫酸盐为焦亚硫酸钾；优选的，所述亚硫酸盐溶液中亚硫酸盐的浓度为100‑1000mmol/L；优选的，所述亚硫酸盐溶液的滴加速度为0.5‑3mL/min；优选的，所述含有亚硫酸盐的豌豆蛋白溶液中亚硫酸盐的浓度为2‑8mmol/L。6.根据权利要求5所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述加热处理的温度为75‑95℃，加热处理的时间为20‑45min；和/或，所述制备方法包括：采用冰水将加热后的反应液冷却至15‑25℃。7.根据权利要求2所述的自组装蛋白纳米颗粒的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述透析处理采用的透析袋的截留分子量为6000‑12000Da，和/或，所述透析处理的温度为2‑8℃；和/或，透析处理过程中，所述豌豆蛋白纳米颗粒分散液与水的体积比为1∶5‑1∶20，换水次数为2‑8次。8.由权利要求1‑7中任一项所述方法制备的自组装蛋白纳米颗粒。9.根据权利要求8所述的自组装蛋白纳米颗粒，其特征在于：所述自组装蛋白纳米颗粒的平均粒径为124.7‑297.5nm，ζ‑电位为‑32.2～‑35.8mV。10.权利要求8或9所述的自组装蛋白纳米颗粒于食品、医药或化妆品领域中的应用。2CN113332165A说明书1/7页一种自组装蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明属于纳米材料技术领域，具体涉及一种自组装蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。背景技术[0002]纳米颗粒作为生物活性营养物和药物的封装和递送系统，在过去的几十年里引起了研究者的广泛关注。纳米颗粒的亚细胞大小具有良好的功能特性，如优越的稳定性，延长胃肠道停留时间，提高的组织穿透性，增强的细胞摄取能力。与合成材料形成的纳米颗粒相比，天然生物基纳米颗粒具有良好的生物相容性和生物降解性，蛋白质作为一种两亲性生物聚合物被认为是制备纳米颗粒的理想材料。[0003]蛋白质纳米颗粒的制备方法被广泛探索，如戊二醛