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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114805625A(43)申请公布日2022.07.29(21)申请号202210500493.X(22)申请日2022.05.10(71)申请人滨海宇美科技有限公司地址224500江苏省盐城市滨海县滨海医药产业园华佗路1号(72)发明人不公告发明人(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所37218专利代理师张贵宾(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称一种以海参内脏制备海参多糖的方法(57)摘要本发明涉及一种以海参内脏制备海参多糖的方法,其是选取海参内脏为原料,清洗、干燥、粉碎后加入正己烷或石油醚进行萃取脱脂处理;脱脂处理后的海参内脏粉去除有机溶剂,加入乙醇萃取去除皂苷;干燥后置于酶解灌中,加入水,充分溶胀后,加入复合蛋白酶Ⅰ进行一次酶解,灭酶;所得到的海参酶解液离心,超滤后所得的超滤液置于酶解罐中加入复合蛋白酶Ⅱ进行酶解处理,灭酶;调节pH值后冷却低温,静置,离心,超滤,收集截留液干燥,脱色,除杂,冷冻干燥得海参多糖干品。本发明的制备方法工艺合理,技术先进,操作可行;采用本制备方法制取的海参多糖,经测定:海参多糖含量大于95%。CN114805625ACN114805625A权利要求书1/1页1.一种以海参内脏制备海参多糖的方法,其特征在于:经过下列工艺步骤:(1)原料选取与处理:选取海参内脏为原料,进行清洗、干燥、粉碎处理,过100~300目筛,得海参内脏粉,备用;(2)脱脂处理:将步骤(1)所得到的海参内脏粉加入正己烷或石油醚进行萃取脱脂处理6~10h;其中,所述的正己烷或石油醚的用量为海参粉质量的4~10倍;(3)脱除皂苷:将步骤(2)脱脂处理后的海参内脏粉去除正己烷或石油醚,加入浓度为60~85%的乙醇萃取处理24~48h,脱除皂苷;其中,所述的乙醇的用量为脱脂处理后的海参粉质量的6~20倍;(4)一次酶解:将步骤(3)中脱除皂苷后的海参内脏粉去除乙醇,真空干燥后置于酶解罐中,加入脱除皂苷后的海参内脏粉质量的15~40倍的纯净水,充分溶胀后加热至100℃保持20~30min,杀灭微生物;冷却至45~55℃,加入碱性蛋白水解酶酶解2~3h;其中,所述的碱性蛋白水解酶的酶用量为脱除皂苷后的海参内脏粉质量的0.3~5%;调节pH值7.0~8.0,加入胰蛋白酶酶解5~6h,其中,所述的胰蛋白酶的酶用量为脱除皂苷后的海参粉质量的0.3~5%;酶解完毕后,加热至100℃保持灭酶20~30min,得海参内脏一次酶解液;(5)一次超滤:将步骤(4)中所得到的海参内脏一次酶解液离心,收取上清液;将上清液通过分子量为10000Da的滤膜超滤,收集截留液,得海参内脏一次超滤液;(6)二次酶解:将步骤(5)收集的海参内脏一次超滤液置于酶解罐中,加入超滤液体积的3~6倍的纯净水,加热至45~55℃,加入风味蛋白水解酶酶解3~4h,其中,所述的风味蛋白水解酶的酶用量为脱除皂苷后的海参内脏粉质量的0.3~5%;酶解完毕后,加热至100℃保持灭酶20~30min,得海参内脏二次酶解液;(7)二次超滤:将步骤(6)所得到海参内脏二次酶解液调节pH值4~5,冷却至2~5℃,静置6~12h;离心,收取上清液;将上清液通过分子量为10000Da的滤膜超滤,收集截留液,得海参内脏二次超滤液;(8)脱色:向步骤(7)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇,4℃静置4h,过滤,滤液中加入滤液重量0.5%的活性碳,80℃保温25‑35min进行脱色,抽滤,收集滤液;(9)除蛋白:向步骤(8)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇,4℃静置4h,过滤,向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L,4℃静置过夜,离心10‑15min,沉淀进行冷冻干燥得成品。2CN114805625A说明书1/5页一种以海参内脏制备海参多糖的方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术,尤其是一种以海参内脏制备海参多糖的方法。背景技术[0002]海参是生活在海洋中的一种软体动物,不仅是一种传统的珍贵食品,也是一种名贵的药材。在海参体内主要含有多种活性有效成份,如海参多糖、海参蛋白、海参皂甙等,具有较高的营养价值和药用价值。[0003]海参多糖具有多种生理活性,主要表现为:抗肿瘤;抗凝血;提高免疫力;延缓衰老;降血脂;美容;抗炎症(如关节炎)等。[0004]通常人们食用海参,都是选择海参皮肉(体壁),而海参的内脏,即海参的肠和卵,也称为海参花则当作下脚料被废弃掉了,实际上海参的内脏也含有较为丰富的多糖和蛋白质及其他多种活性物质,据研究证实海参下脚料中总糖含量约为3~7%;海参下脚料中粗蛋白含量约为30~40%。如此优质的