一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103724442103724442A(43)申请公布日2014.04.16(21)申请号201310649424.6(22)申请日2013.12.06(71)申请人山东好当家海洋发展股份有限公司地址264305山东省威海市荣成市虎山镇好当家工业园区虎山街2027号申请人山东省科学院生物研究所(72)发明人袁文鹏张绵松胡炜刘昌衡孙永军孟秀梅王志伟鞠文明唐晓波毕春雨(51)Int.Cl.C08B37/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法(57)摘要本发明涉及一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法，其是选取干海参为原料，粉碎后加入正己烷或石油醚进行萃取脱脂处理；脱脂处理后的海参粉去除有机溶剂，加入乙醇萃取去除皂苷；干燥后置于酶解灌中，加入水，充分溶胀后，加入动物蛋白水解酶和胰蛋白酶进行一次酶解，灭酶；所得到的海参酶解液离心，超滤后所得的超滤液置于酶解罐中加入风味蛋白水解酶进行酶解处理，灭酶；调节pH值后冷却低温，静置，离心，超滤，收集截留液干燥，得海参多糖干品。本发明的制备方法工艺合理，技术先进，操作可行；采用本制备方法制取的海参多糖，经测定：蛋白含量低于0.5%。CN103724442ACN103724ACN103724442A权利要求书1/1页1.一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法，其特征在于：经过下列工艺步骤：（1）原料选取与处理选取干海参为原料，进行粉碎处理，过100～300目筛，得海参粉，备用；（2）脱脂处理将步骤(1)所得到的海参粉加入正己烷或石油醚进行萃取脱脂处理6～10h；其中，所述的正己烷或石油醚的用量为海参粉质量的4～10倍；（3）脱除皂苷将步骤(2)脱脂处理后的海参粉去除正己烷或石油醚，加入浓度为60～85%的乙醇萃取处理24～48h，脱除皂苷；其中，所述的乙醇的用量为脱脂处理后的海参粉质量的6～20倍；（4）一次酶解将步骤(3)中脱除皂苷后的海参粉去除乙醇，真空干燥后置于酶解灌中，加入脱除皂苷后的海参粉质量的15～40倍的纯净水，充分溶胀后加热至100℃保持20～30min，杀灭微生物；冷却至45～55℃，加入动物蛋白水解酶酶解2～3h；其中，所述的动物蛋白水解酶的酶用量为脱除皂苷后的海参粉质量的0.3～5%；调节pH值7.0～8.0，加入胰蛋白酶酶解5～6h，其中，所述的胰蛋白酶的酶用量为脱除皂苷后的海参粉质量的0.3～5%；酶解完毕后，加热至100℃保持灭酶20～30min，得海参一次酶解液；（5）一次超滤将步骤(4)中所得到的海参一次酶解液离心，收取上清液；将上清液通过分子量为10000Da的滤膜超滤，收集截留液，得海参一次超滤液；（6）二次酶解将步骤(5)收集的海参一次超滤液置于酶解罐中，加入超滤液体积的3～6倍的纯净水，加热至45～55℃，加入风味蛋白水解酶酶解3～4h，其中，所述的风味蛋白水解酶的酶用量为脱除皂苷后的海参粉质量的0.3～5%；酶解完毕后，加热至100℃保持灭酶20～30min；得海参二次酶解液；(7）二次超滤将步骤(6)所得到海参二次酶解液调节pH值4～5，冷却至2～5℃，静置6～12h；离心，收取上清液；将上清液通过分子量为10000Da的滤膜超滤，收集截留液，得海参二次超滤液；（8）干燥将步骤(7)所得到的海参二次超滤液喷雾干燥，得海参多糖干品。2CN103724442A说明书1/4页一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法技术领域[0001]本发明涉及多糖的制备，尤其是一种低蛋白高纯度海参多糖的制备方法。背景技术[0002]我们知道，海参多糖是海参体壁的重要组成成分，大量的文献证实海参多糖具有抗凝血、抗肿瘤、增强免疫力、降血脂等多种生物活性。因此，在功能性食品和海洋药物开发方面展现出了良好的应用前景。[0003]海参多糖在海参体壁中以糖肽键与蛋白相连。蛋白是影响海参多糖品质的主要杂质，采用适当方法降低产物中蛋白含量是制备高纯度海参多糖的关键。去除蛋白的方法有多种，通常采用Sevage法及三氯乙酸法等，然而这些方法在去除蛋白时效率低，同时会造成多糖的大量损失，不利于产业化生产。[0004]目前，还未见过到制备低蛋白含量海参多糖的报道。发明内容[0005]为了克服现有技术中Sevage法及三氯乙酸法等方法制取多糖存在去除蛋白时效率低、多糖损失大的不足，本发明提供一种工艺合理、技术先进、操作可行的低蛋白高纯度海参多糖的制备方法。该制备方法是采用酶解-超滤-酶解-超滤偶联法制备海参多糖，其提取所得多糖蛋白质含量极低，具有纯度高，免疫原性低等特性。[0006]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种低蛋白高纯