改善的负载MRNA的脂质纳米颗粒和其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114390921A(43)申请公布日2022.04.22(21)申请号202080062330.7(74)专利代理机构北京市君合律师事务所(22)申请日2020.07.0811517代理人顾云峰吴瑜(30)优先权数据62/871,5132019.07.08US(51)Int.Cl.A61K9/51(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日A61K47/60(2017.01)2022.03.04A61K47/69(2017.01)(86)PCT国际申请的申请数据A61K48/00(2006.01)PCT/US2020/0411222020.07.08A61K38/00(2006.01)(87)PCT国际申请的公布数据A61K39/395(2006.01)WO2021/007278EN2021.01.14C12N15/88(2006.01)(71)申请人川斯勒佰尔公司地址美国马萨诸塞州(72)发明人S·卡夫A·萨罗德F·德罗莎权利要求书4页说明书60页附图2页(54)发明名称改善的负载MRNA的脂质纳米颗粒和其制备方法(57)摘要本发明提供了一种包封mRNA的改进的脂质纳米颗粒调配物，其包含DEPE作为辅助脂质。CN114390921ACN114390921A权利要求书1/4页1.一种用于向有需要的受试者递送mRNA的脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒包含一种或多种阳离子脂质、一种或多种PEG修饰的脂质和一种或多种包封所述mRNA的辅助脂质，其中所述一种或多种辅助脂质包括1,2‑二芥酰基‑sn‑甘油基‑3‑磷酸乙醇胺(DEPE)。2.如权利要求1所述的脂质纳米颗粒，其中与具有相同脂质组分和量的第二脂质纳米颗粒中的相同mRNA的表达相比，向所述受试者施用所述脂质纳米颗粒导致所述mRNA的表达增强，不同之处在于所述第二脂质纳米颗粒包含不同的一种或多种辅助脂质并且不包含DEPE。3.如权利要求2所述的脂质纳米颗粒，其中所述不同的一种或多种辅助脂质包括二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)、1,2‑二亚油酰基‑sn‑甘油基‑3‑磷酸乙醇胺(DLOPE)、1‑棕榈酰基‑2‑油酰基‑sn‑甘油基‑3‑磷酸乙醇胺(POPE)和/或其组合。4.如权利要求2或3所述的脂质纳米颗粒，其中表达相对于所述第二脂质纳米颗粒增强至少两倍。5.如任一项前述权利要求所述的脂质纳米颗粒，其中所述脂质纳米颗粒中的所述DEPE以10摩尔％至50摩尔％的浓度存在。6.如任一项前述权利要求所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种阳离子脂质是或者包含一至四条各自具有C10‑C16长度的烷基链。7.如权利要求1至5中任一项所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种阳离子脂质是包含四条脂族链的类脂质。8.如权利要求7所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种阳离子脂质是或者包括下式的阳离子脂质：或其药学上可接受的盐；12其中每个R和R独立地是H或C1‑C6脂族；每个m独立地是具有1至4的值的整数；每个A独12立地是共价键或亚芳基；每个L独立地是酯、硫酯、二硫键或酸酐基团；每个L独立地是C2‑13C10脂族；每个X独立地是H或OH；并且每个R独立地是C6‑C20脂族。39.如权利要求8所述的脂质纳米颗粒，其中每个R独立地是C8‑C16脂族。10.如任一项前述权利要求所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种PEG修饰的脂质包含长度为最多5kDa的聚乙二醇链，所述聚乙二醇链共价连接至具有长度为C6‑C20的烷基链的脂质。11.如任一项前述权利要求所述的脂质纳米颗粒，所述脂质纳米颗粒还包含一种或多种固醇。12.如权利要求11所述的脂质纳米颗粒，其中所述一种或多种固醇包括基于胆固醇的脂质。2CN114390921A权利要求书2/4页13.如权利要求12所述的脂质纳米颗粒，其中所述基于胆固醇的脂质是胆固醇和/或PEG化的胆固醇。14.如任一项前述权利要求所述的脂质纳米颗粒，其中所述mRNA是编码在体内翻译为治疗性蛋白质或肽的蛋白质的mRNA。15.如权利要求14所述的脂质纳米颗粒，其中编码所述蛋白质或肽的所述mRNA被全身递送，并且在施用后24小时或更长时间在肝脏或血清中可检测到所翻译的蛋白质或肽。16.如权利要求15所述的脂质纳米颗粒，其中所述多肽是治疗性多肽。17.如权利要求16所述的脂质纳米颗粒，其中所述治疗性多肽是(a)抗体轻链或抗体重链，或(b)所述受试者中不存在或缺乏的多肽。18.如权利要求14所述的脂质纳米颗粒，其中编码蛋白质的所述mRNA编码肽。19.如权利要求18所述的脂质纳米颗粒，其中所述肽是抗原。20.一种用于向有需要的受试者递送mRNA的方法，所述方法包括向所述受试者施用脂质纳米颗粒，所述脂质纳米