负载mRNA的脂质纳米颗粒的稳定组合物及制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114401748A(43)申请公布日2022.04.26(21)申请号202080065024.9A·萨罗德(22)申请日2020.07.23(74)专利代理机构北京市君合律师事务所(30)优先权数据1151762/877,5972019.07.23US代理人顾云峰吴瑜(85)PCT国际申请进入国家阶段日(51)Int.Cl.2022.03.16A61K48/00(2006.01)A61K9/51(2006.01)(86)PCT国际申请的申请数据A61K47/24(2006.01)PCT/US2020/0432232020.07.23A61K47/10(2006.01)(87)PCT国际申请的公布数据A61P43/00(2006.01)WO2021/016430EN2021.01.28C12N15/88(2006.01)(71)申请人川斯勒佰尔公司地址美国马萨诸塞州(72)发明人S·卡夫F·德罗莎M·哈特莱因N·瓦尔加斯·蒙托亚P·帕特尔权利要求书4页说明书49页附图7页(54)发明名称负载mRNA的脂质纳米颗粒的稳定组合物及制备方法(57)摘要本发明提供了一种改进的用于制备负载mRNA的脂质纳米颗粒(mRNA‑LNP)的组合物和方法。在一些实施方案中，本发明提供了具有优异稳定性的mRNA‑LNP，并且在期望包含低PEG修饰的脂质或不包含PEG修饰的脂质的LNP的情况下是特别有用的。CN114401748ACN114401748A权利要求书1/4页1.一种稳定组合物，其包含包封信使RNAmRNA的脂质纳米颗粒，其中所述mRNA编码蛋白质或肽，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒包含一种或多种阳离子脂质、一种或多种非阳离子脂质和小于0.5％的PEG修饰的脂质或PEG，并且其中包封所述mRNA的所述脂质纳米颗粒在一次或多次冷冻解冻后是稳定的。2.根据权利要求1所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒包含一种阳离子脂质、二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)和小于约0.5％的PEG修饰的脂质或PEG。3.根据权利要求1或权利要求2所述的稳定组合物，其中包封所述mRNA的所述脂质纳米颗粒在一个或多个冷冻解冻循环后保持平均直径在原始平均尺寸的50％以内。4.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中包封所述mRNA的所述脂质纳米颗粒在一个或多个冷冻解冻循环后保持平均直径在所述原始平均尺寸的10％以内。5.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中包封所述mRNA的所述脂质纳米颗粒在一个或多个冷冻解冻循环后保持平均直径在所述原始平均尺寸的5％以内。6.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒具有约50％至99％的mRNA包封效率。7.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒还包含基于胆固醇的脂质。8.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒包含0.4％的PEG修饰的脂质或更少、0.3％的PEG修饰的脂质或更少、0.2％的PEG修饰的脂质或更少、或0.1％的PEG修饰的脂质或更少。9.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒基本上不含PEG修饰的脂质。10.根据前述权利要求中任一项所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒包含两亲性嵌段共聚物。11.根据权利要求10所述的稳定组合物，其中所述脂质纳米颗粒中的每一个脂质纳米颗粒包含小于3％的两亲性嵌段共聚物、小于2.5％的两亲性嵌段共聚物、小于2％的两亲性嵌段共聚物、小于1.5％的两亲性嵌段共聚物、小于1％的两亲性嵌段共聚物、小于0.5％的两亲性嵌段共聚物、小于0.05％的两亲性嵌段共聚物或小于0.01％的两亲性嵌段共聚物。12.根据权利要求11所述的稳定组合物，其中所述组合物包含以重量计占总组合物的小于0.05重量％、小于0.04重量％、小于0.03重量％、小于0.02重量％或小于0.01重量％的两亲性嵌段共聚物。13.根据权利要求12所述的稳定组合物，其中所述组合物包含残余的两亲性嵌段共聚物。14.根据权利要求10‑13中任一项所述的稳定组合物，其中所述两亲性嵌段共聚物为泊洛沙姆。15.根据权利要求14所述的稳定组合物，其中所述泊洛沙姆选自泊洛沙姆84、泊洛沙姆101、泊洛沙姆105、泊洛沙姆108、泊洛沙姆122、泊洛沙姆123、泊洛沙姆124、泊洛沙姆181、泊洛沙姆182、泊洛沙姆183、泊洛沙姆184、泊洛沙姆185、泊洛沙姆188、泊洛沙姆212、泊洛沙姆215、泊洛沙姆217、泊洛沙姆231、泊洛沙姆2