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《食品工业科技》ScienceandTechnologyofF00dIndustryVom.22.No.2.2001 《恭多糖捏蓉地 _。_¨j可——t寸==曩i覃==jf 陈海霞谢笔钧 (华中农业大学食品科技系,武汉430070) ◆_●_w◆一~一●._●⋯●●●◆⋯一⋯◆●⋯⋯●●_w●●一⋯一●1◆●_w◆一⋯一◆●_ 摘要用醇沉淀法、超滤法和CTAB沉淀法分别制备了茶多糖粗提物,对粗提物的组成进行r分析并对多糖 的清除羟基自由基的能力进行了比较结果表明,超滤法所得多糖纯度高,且活性也最高,对羟基自由基抑制率可分 别比CrAB沉淀法、醇沉淀法提高235%、371%。通过纸层折和气相色谱分析,三种工艺所提取的茶多精均山阿拉 伯糖、木糖、棱糖、葡萄糖、半乳糖及半乳糖醛酸组成但组成比不同 关键词提取工艺茶多糖组成生物活性 AbstractGreenteacrudeysaecharidesextractedbythreeextractiontechnologies.includingthemethodofusingetha— nol,themethodofusingultra—filtration.themethodofusingCTAB.Theircompositionsandtiiofogic~actlvitie~-wel~studiedhere.Re· stdtsshewedthatthemethodofuBultra—fil~afionthebest.Thecrudepolysacchafidesobtainedbytheultra—fil~afionmethod ac~vethantheothertwomethods235%and371%.Thepolysaecharideswcomposedofarabinoseribc~e,xylose. gluco~andgalactosewithsl~mllerproportionsofgalacteronieacid.Theratiosofmonos~charidewerediferentowSngtodifereattech— nology KeywodsexLraetiontechnolo~';teapolysaee~mfides;composition:biologicala~ivity ●●一●一●●⋯●‘’●、●●~-’●I~●一⋯‘’●_’●●一’●一●一⋯~⋯~一●‘●●●⋯ 近年来,随着糖类生化研究技术的发展,人们对绿茶坚兰水_水提液兰翌截留液(截留分子 活性多糖的生物功能有了新的认识。大量的研究表 t-lo0oo)坚沉淀物——冷冻干燥——摹多耱 明,茶多糖具有防辐射、抗凝血及抗血栓、降血糖、增 提取物 强机体免疫能力、降血压、降血脂、耐缺氧及增加冠状 1.23CTAB沉淀法 动脉血流量等作用~。在对茶多糖的研究中发现, 绿茶兰兰水提液坚浓缩液 不同提取方法对茶多糖生物活性有很大的影响。本 研究对不同提取工艺的茶多糖得率、组成及生物活性_三兰cT兰兰沉淀物苎水溶液~三竺沉 进行了比较,测定了其单糖组成,为茶多糖的进一步淀物一冷冻干燥一蔡多糖提取物 研究提供依据。1.3测定方法 1材料与方法1.3,1茶多糖含量的测定采用苯酚——硫酸 1.1材料与仪器法⋯。 绿茶为湖北宣恩县富硒源茶厂生产;苯酚、硫1.32摹多酚含量的测定采用酒石酸亚铁比色 酸、乙醇、CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)、氯化钠等法。 试剂均为分析纯。1.3.3可溶性蛋白质测定采用考马斯亮蓝G一250 Millipore超滤器,uv.265FW紫外可见分光光度法。 计,Alpha.I.5真空冷冻干燥机,Shimadzu—G-9A气相色1.3.4蔡多糖对羟基自由基(·OH)的抑制率的测定 谱仪。采用D一脱氧核糖一铁体系法。 1.2样品制备1.3.5纸层析分析单糖组成称取不同提取工艺 1.2.1醇沉淀法制备的多糖粗提物各0.5g,分别用蒸馏水溶解,用 绿茶70℃温水30rain水提液堕坚浓缩液Sevag法除蛋白5次,用自来水透析24h,再用蒸馏水 透析12h,透析后用氨水调pH8.0左右,滴加20%的 兰沉淀物兰要水溶液!沉淀物——冷H0至微黄色,40%保温2h,再按上述方法透析,最 冻干燥一萘多糖提取物后醇析干燥得茶多糖纯化物。取纯茶多糖20mg于试 1.2.2超滤法管中,加2moltL三氟乙酸4ml封管,140~C水解4h,然 ·l8·、 《食品工业科技》ScienceandTechnologyofFb0dIndustryVo1.22.No.2.2001 后挥干三氟乙酸,加水重复几次直至检测为中性,减分析结果相比气相层析中未能检出半乳糖醛酸,而多 压浓缩,