进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检验方法_征求意见稿.doc

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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T0172—FORMTEXT
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代替SN/T0172-2002

进出口食品中厌氧亚硫酸盐
还原梭状芽孢杆菌检验方法
Methodforthedeterminationofanaerobic
Sulfite-reducingclostridiainfoodforimportandexport
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XX发布
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XX实施
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SN/T1071-20XX
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替SN/T1071-2002《进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法》。
本标准与SN/T1071-2002相比，主要技术变化如下：
——将原标准名称《进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽胞杆菌检验方法》修订为《进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检验方法》
——增加了规范性引用文件；
——修改和规范了“设备和材料”；
——增加了平板计数法中的“分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内做空白对照”；
——增加了平板计数法中结果计算的举例；
——将平板计数法中的数值单位“/g(mL)”修改为“CFU/g(mL)”
——将最近似值（MPN）法中的数值单位“/g(mL)”修改为“MPN/g(mL)”
——附录A中增加了2%无菌琼脂的成分和制法。
本标准的附录A和附录B为规范性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：曹际娟，王金玲，张莹，徐君怡，李俊环
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：
——SN/T1071-2002。
进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检验方法
范围
本标准规定了进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检验方法。
本标准适用于进出口食品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌检验。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则
SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南
定义
本标准采用下列定义：
厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌
一群厌氧、过氧化氢酶阴性、能将亚硫酸盐还原为硫化物的革兰氏阳性梭状芽胞杆菌。是食品、水、食品加工设备、食品生产环境等卫生状况的评估指标菌之一。
设备和材料
4.1冰箱：2℃～5℃。
4.2恒温水浴箱：50℃±1℃。
4.3恒温培养箱：36℃±1℃。
4.4天平：感量0.1g。
4.5均质器及均质杯或均质袋。
4.6厌氧条件及相关设备：选择合适大小的厌氧罐、密封效果好的密封盒中，或其他保持厌氧条件的设备中放入厌氧袋，也可在厌氧恒温工作站中进行培养。
4.7无菌吸管：1mL(具0.01刻度)、10mL(具0.1刻度)或微量移液器及吸头。
4.8无菌培养皿：直径90mm。
4.9无菌试管：15mm×150mm。
4.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。
培养基和试剂
5.1氯化钠胰蛋白胨稀释液：见附录A中A.1章。
5.2亚硫酸铁琼脂：见附录A中A.2章。
5.3庖肉培养基：见附录A中A.3章。
5.43%过氧化氢溶液：使用前配制。
5.5缓冲甘油-氯化钠溶液：见附录A中A.4章。
5.62%无菌琼脂：见附录A中A.5章。
样品的贮存和运输
冷冻样品如不能立即进行检验，应置于-18℃保存；非冷冻而易腐蚀的食品，应加等量无菌缓冲甘油-氯化钠溶液（液体食品应加双料），置于4℃冰箱保存。运送样品时，应采取措施，防止样品中微生物数量和性质发生变化。
样品制备
将样品解冻，以无菌操作称取25g样品，放入装有225mL氯化钠胰蛋白胨稀释液的灭菌均质杯（无菌均质袋）内，于8000r/min～10000r/min均质1～2min或用拍击式均质器拍击1min，制成1：10样品匀液。如为液体样品，则无菌操作移样25mL，加入装有225mL氯化钠胰蛋白胨稀释液的灭菌玻璃瓶中，充分混匀后，制成1：10样品匀液。根据