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专题综述 ScienceandTechnologyofFoodIndustry 单核细胞增生性李斯特菌分子生物学 检测技术的研究进展 冯可1,2,胡文忠2,*,姜爱丽2,徐永平1,萨仁高娃2 (1.大连理工大学生命科学与技术学院,辽宁大连116024; 2.大连民族学院生命科学学院,辽宁大连116600) 摘要:单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LM)是主要食源性致病菌之一,可引起李斯特菌病,感染严 重者会出现致死现象。传统的单增李斯特菌检测方法耗时长,步骤繁琐。因此,特异性强,高效性以及简便的检测手 段已成为研究热点。本文综述了运用分子生物学手段对单核细胞增生性李斯特菌检测的研究概况,并对该技术未来 发展趋势进行了展望。 关键词:单核细胞增生性李斯特菌,PCR,Real-timePCR,基因芯片,检测技术 Researchprogressinmolecularbiologydetectionmethodsof Listeriamonocytogenes FENGKe1,2,HUWen-zhong2,*,JIANGAi-li2,XuYong-ping1,SA-ren-gao-wa2 (1.CollegeofLifeScienceandBiotechnology,DalianUniversityofTechnology,Dalian116024,China; 2.CollegeofLifeScience,DalianNationalitiesUniversity,Dalian116600,China) Abstract:Listeriamonocytogeneswasoneofthemostfrequentcausesofdeathasfood-bornepathogensin food.TraditionalmethodstodetectListeriamonocytogenesaretime-consumingandcomplex.Therefore,the highspecificity,highefficiencyandsimpledetectionmethodshavebecomearesearchdirection.Thispaper summarizedmolecularbiologymethodsofthedetectionforListeriamonocytogenesandprospectthe developmentdirectionofthisfield. Keywords:Listeriamonocytogenes;PCR;real-timePCR;DNAmicroarray;detection 中图分类号:TS201.3文献标识码:A文章编号:1002-0306(2014)04-0392-05 李斯特氏菌(Listeria)是一种典型的胞内寄生革济损失已不是偶然事件,自20世纪80年代以来,美 兰氏阳性短杆菌,共分7个种。包括产单核细胞增生国、加拿大、瑞典、法国以及日本等国曾多次暴发因 性李斯特氏菌(L.monocytogenes,LM)、伊氏李斯特单增李斯特菌引起的食物中毒事件,据调查,主要传 菌(L.ivanovii)、无害李斯特菌(L.innocua,又名英洛播媒介为乳制品、肉制品、水产品、果蔬和即食食 克李斯特菌)、韦氏李斯特菌(L.welshmei)、西尔李品[2]。因此,为避免此类食品中毒事件发生,应在食品 斯特菌(L.seeligeri)、格氏李斯特菌(L.grayi)和莫氏保藏与流通过程中对其进行实时监控,快速而准确 李斯特菌(L.murrayi)。其中,单核细胞增生性李斯特的检测单增李斯特菌的消长情况[3]。而传统的单增李 菌(LM)是一种人畜共患病的食源性致病菌,为兼性斯特菌检测方法需要经过菌种分离,生化鉴定,血清 厌氧型无芽孢杆菌,广泛存在于畜禽类产品、乳制型实验等过程。操作繁琐,耗时长,检测灵敏度低,无 品、水产品以及土壤中,其最适生长温度为36℃,但法满足市场需求。目前,利用免疫学、代谢学、分子生 在0~4℃的低温环境中仍可生长繁殖。人类受感染后物学和生物传感器等技术手段对单增李斯特菌的检 主要表现为败血症、脑膜炎、胃肠炎、孕妇流产等症测在不断的完善。其中分子生物学手段因其高效性、 状。婴幼儿,老年人及免疫耐受病人临床死亡率为特异性强、灵敏度高、检测时间短等优点已成为检测 30%左右[1]。食品中单增李斯特菌的主要发展方向。 单增李斯特菌污染食品并给人类造成严重的经1单核细胞增生性李斯特菌的靶基因 利用分子生物学手段对致病菌进行检测时,通 常根据病原菌特有的致病基因或部分特异性基因为 收稿日期:2013-08-14*通讯联系人