单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立.pdf

中国畜牧兽医2013年第40卷第9期生理生化·131·

单核细胞增生性李斯特菌感染ICR小鼠模型的建立

尹海畅，吕兴锋，刘思国，王伟，王建超，孟庆文
(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，兽医生物技术国家重点实验室实验动物研究室，黑龙江哈尔滨150001)

摘要:单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes，LM)是一种人畜共患食源性致病菌，能引起人和动物较为严重的
感染症状现广泛使用具有免疫活性的小鼠模型测定半数致死量()来评价不同菌株的致病性为建立的
。LD50LM。LMICR
小鼠模型，本研究采用1/2A血清型的N21LM菌株，分别以106、107、108、109和1010CFU的剂量口腔灌注感染6周龄ICR小
鼠，每组只;另取只接种作为对照组，测定对小鼠的;另取只小鼠，平均分为组，公母各半，以测
1010PBSLMICRLD50402
定的剂量接种，分别对各组小鼠临床症状组织病理变化体重变化及组织中细菌载量进行评价结果发现，
LD50LM、、。N21LM
菌株对小鼠的为9．25;感染周期为左右，感染小鼠出现被毛粗糙精神萎靡阴茎垂出及体重下降等临床
ICRLD5010CFU10d、、
症状。组织病理学分析结果显示，肝脏先后出现实质内灶状细菌团块、形成血栓、细胞坏死等;脾脏主要表现为白髓内淋巴细
胞减少;肺脏主要表现为纤维素性肺炎。菌落计数和ReAl-tiMePCR的检测结果发现肝脏中细菌载量最高，脾脏次之。结果表
明，ICR小鼠能作为单核细胞增生性李斯特菌的感染模型。本试验结果为研究LM的致病机制、疫苗研究及抗菌肽转基因小
鼠抗LM的评价奠定了基础。
关键词:单核细胞增生性李斯特菌;感染;ICR小鼠模型
中图分类号:S852．61文献标识码:A文章编号:1671-7236(2013)09-0131-05

单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocyto-羊，并成功的从脑、淋巴结和心血分离到该菌，建立
genes，LM)是广泛存在环境中的革兰氏阳性细菌，最动物感染模型;但以绵羊作为感染模型常受到价格、
早于1926年由MurrAy从患败血症的大鼠和兔子中品种、年龄及个体差异等因素的限制，且需对绵羊进
分离得到(HAMon等，2006)，现已呈世界性分布;与行免疫抑制剂处理。目前，鼠类是最广泛的应用于
多种动物的严重疾病有关，可引起动物不同类型的研究LM的动物模型，且在小鼠模型上关于致病机
李氏杆菌病，如脑膜炎、败血症、角膜炎、肺炎、流产理、毒力因子、感染强度、基因影响因子和评价LM
等(CossArt等，2008;Czuprynski等，2003)。为有效菌株致病性已有研究(KAzue等，2006;SAyuri等
的预防和控制LM的暴发，欧美等很多国家将其列2011)。通过静脉注射和腹腔注射的方式接种小鼠
入法定的报告疾病，且建立了完善的监测系统(冯可用来研究一些野生菌株、实验室菌株和基因改造
，);
延芳等2010中国于21世纪初开始监测食品中菌株(BArbour等，2001)，然而人和动物的李氏杆菌
的污染共包括个血清型，其中
LM。LM131/2A、1/病大多数都是通过食用污染LM的食物而导致的，
和这个血清型引起全世界报道的的李
2b4b395%Czuprynski等(2003)通过灌胃接种的方法来评价
斯特菌病病例，而其中大多数病例是由血清型菌
4bLM对小鼠的感染，但与直接感染LM的天然感染途
株感染所致，为了评价和研究各相关毒力因子，
LM径相比仍有差异。
通常使用和血清型的菌株(等，
1/2A1/2cVines本研究通过口腔灌注的方式接种1/2A血清型
)
1998。N21LM菌株感染6周龄ICR小鼠，测定临床症状、
已成为广泛研究细胞内病原菌致病机理和
LM体重变化细菌对小鼠的组织的细菌含
、ICRLD50、
细胞免疫调控机制的模型。国内曾用LM感染绵
量及LM溶血素(Hly)基因拷贝数，建立LM的ICR
小鼠感染模型，为研究LM的致病机制、疫苗研发及
收稿日期:2013-01-29
抗菌肽转基因小鼠抗的评价奠定基础
作者简介:尹海畅(1988－)，女，黑龙江人，硕士生，研究方向:病LM。
原微生物及分子生物学。1材料与方法
通信作者:孟庆文。E-MAil:[e-mail]1．1菌株和试验动物N21LM菌株由哈尔滨兽医
基金项目:黑龙江省高等学校科技创新团队项目();
2010td02研究所细菌室提供;5周龄ICR小鼠由北京维通利
“十二五”农村领域国家科技计划课题
华实验技术有限公司提供。
(2011AA100305-2);转基因生物新品种科技重大专
对小鼠的测定将菌株划线在
项(2009ZX08006-001B)。1．2LMICRLD50
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