草鱼促性腺激素基因原核表达及多克隆抗体的制备的中期报告.docx

草鱼促性腺激素基因原核表达及多克隆抗体的制备的中期报告
该研究旨在探究草鱼性腺激素基因在原核表达中的表达情况，并制备相应的多克隆抗体。
研究方法：
1.获取草鱼性腺组织进行总RNA提取，用RT-PCR检测性腺激素基因表达情况；
2.根据序列设计性腺激素基因的引物，得到目标DNA，并进行PCR扩增；
3.将扩增得到的DNA片段克隆至原核表达载体pET-32a中；
4.将重组质粒转化至大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)，并进行表达；
5.采用SDS-PAGE和Westernblot检测重组蛋白是否表达成功；
6.制备重组蛋白多克隆抗体。
研究进展：
1.成功从草鱼性腺组织中提取到总RNA，并通过RT-PCR检测出性腺激素基因的表达；
2.设计和合成性腺激素基因的引物，并通过PCR扩增得到目标DNA；
3.将目标DNA克隆至pET-32a中，并成功转化至大肠杆菌BL21(DE3)中；
4.表达成功的蛋白经SDS-PAGE和Westernblot检测，证实重组蛋白表达成功；
5.成功将重组蛋白注射至小鼠体内，制备了多克隆抗体。
研究结论：
本研究成功制备了草鱼性腺激素基因的多克隆抗体，并成功表达了其重组蛋白，为后续草鱼性腺激素的研究奠定了基础。