Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的中期报告.docx
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Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的中期报告.docx
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的中期报告本项目旨在探究Nanog基因在原核表达中的功能及蛋白质结构特征,为其后续在细胞和动物实验中的应用打下基础。以下是本项目的中期报告:一、实验进展:1.原核表达:首先,我们利用PCR扩增得到了Nanog基因的编码序列,并使用基因克隆技术将其克隆到表达载体pET28a中。之后,我们利用大肠杆菌BL21(DE3)表达感受态菌株进行原核表达。2.蛋白纯化:通过紫外可见光谱测定,我们发现Nanog蛋白在感受态菌株中成功表达,但是出现了大量的包涵体。因此,我们采用了
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的综述报告.docx
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的综述报告Nanog基因是一种高度保守的转录因子,它在胚胎干细胞(ESC)和诱导型多能干细胞(iPSCs)中具有重要的功能。该基因可以促进细胞自我更新和诱导干细胞再分化,因此在干细胞研究和再生医学中具有广泛的应用前景。为了更好地理解它在这些生物学过程中的作用,研究人员进行了大量的实验研究,专门研究了该基因的原核表达、蛋白纯化和抗体制备等方面的问题。首先,研究人员对Nanog基因的原核表达进行了深入的研究。他们使用了不同的表达载体、感受态菌株和工艺条件来优化Nan
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的开题报告.docx
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的开题报告一、研究背景Nanog是一种关键的转录因子,最早发现于小鼠胚胎干细胞中,并在多种类型的细胞中表达。Nanog对于维持胚胎干细胞的自我复制和未分化状态至关重要,并且在晚期胚胎发育中也有重要的作用。其功能缺陷会导致胚胎发育停滞,而高表达则可能促进肿瘤的发生。因此,了解Nanog的生物学功能,对于解析胚胎发育、干细胞生物学以及诊断和治疗肿瘤具有重要意义。二、研究目的本研究主要目的是通过原核表达、蛋白纯化及抗体制备等技术,获得高效纯化的Nanog蛋白和高特异性
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的任务书.docx
Nanog基因的原核表达、蛋白纯化及抗体制备的任务书任务目标:本任务的主要目标是将Nanog基因在原核表达下进行表达,重组蛋白进行纯化,并且生成具有高特异性的抗Nanog抗体。任务描述:1.设计合适的引物并克隆Nanog基因根据序列分析,设计适当的引物将Nanog基因扩增,然后将其克隆到原核表达载体中。2.原核表达重组蛋白将重组Nanog基因的表达载体转化到大肠杆菌中,利用诱导剂诱导表达重组Nanog蛋白,并通过SDS-PAGE、Westernblot、质谱等方法检测表达的蛋白质量和纯度。3.蛋白纯化对表
PRGL基因的原核表达及抗体制备的中期报告.docx
PRGL基因的原核表达及抗体制备的中期报告本实验的目的是在原核系统中表达PRGL基因,并制备Anti-PRGL抗体。以下是中期报告。1.PRGL基因的克隆和表达:首先,从PRGLcDNA克隆了PRGL基因,并将其插入到原核表达载体pET28a(+)中。然后,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过SDS-PAGE鉴定,发现在IPTG诱导后,BL21(DE3)中出现了一个相对分子质量与源PRGL蛋白相符的蛋白带,表明PRGL基因在大肠杆菌中被成