一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用.pdf
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一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种酵母基因组编辑载体及其构建方法和应用,以gRNA编码质粒P为出发载体,在该载体的复制起始点Ori两端分别引入同向34bp的LoxP序列,并在质粒P骨架位置引入Cre重组酶基因表达盒,获得酵母基因组编辑载体。该载体在以CRISPR/Cas9为媒介的基因编辑中的应用,能实现对酿酒酵母基因组的高效、多轮编辑。
一种用于果蝇基因组无缝编辑的质粒载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种用于果蝇基因组无缝编辑的质粒载体及其构建方法和应用。一种用于果蝇基因组无缝编辑的质粒载体pGX‑DsRed‑ITRs‑TTAA,所述的pGX‑DsRed‑ITRs‑TTAA含有3’ITRS‑DeRed‑5’ITRS元件,其中DsRed基因不含有BbsI识别位点,DsRed基因序列上、下游分别为pigggBac转座子3’和5'ITRS,3’和5'ITRS引入分别引入了BbsI和BsaI内切酶位点,且紧邻TTAA序列。利用本发明质粒构建果蝇基因组无缝编辑所需同源臂供体质粒,可以将质粒构建从多片
一种穿梭载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种穿梭载体及其构建方法和应用。所述穿梭载体包括大肠杆菌的质粒复制子和大肠杆菌抗性筛选基因;所述大肠杆菌的质粒复制子为R6K,所述大肠杆菌抗性筛选基因为rpsL基因或pheS基因;所述穿梭载体中不含温敏型复制子和sacB基因。本发明的穿梭载体能够降低对BAC和穿梭载体之间进行同源重组筛选的假阳性率,减少对温度的依赖,提高筛选的准确性和简化流程。不仅可用于大肠杆菌基因组的改造,还可用于在基因组外的遗传物质上引入特定点突变。
大豆多基因编辑表达载体及其构建方法与应用.pdf
本发明公开了大豆多基因编辑表达载体及其构建方法与应用。该大豆多基因表达载体包括至少2个大豆U6启动子表达的sgRNA表达盒串联形成的多基因编辑元件;每个所述大豆U6启动子表达的sgRNA表达盒依次包括大豆U6启动子、sgRNA靶序列识别区和Cas9蛋白结合的sgRNAscaffold区;每个所述大豆U6启动子表达的sgRNA表达盒中的sgRNA靶序列识别区对应不同靶基因;每个所述sgRNA表达盒中的大豆U6启动子不同。该大豆多基因编辑表达载体不仅可以补充大豆多基因编辑的方法,同时可以有效的提高编辑效率。
一种重组杆状病毒载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种重组杆状病毒载体,重组杆状病毒载体包括p10启动子、EGFP核酸序列、pH启动子、Bmp53核酸序列;本发明还提供了该重组杆状病毒载体构建方法及应用。本发明构建的重组杆状病毒载体可以显著提高Bmp53基因在家蚕中的表达量,同时通过将Bmp53基因与绿色荧光基因EGFP基因共表达,使Bmp53基因的表达可视化,便于研究观察。