一种穿梭载体及其构建方法和应用.pdf
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一种穿梭载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种穿梭载体及其构建方法和应用。所述穿梭载体包括大肠杆菌的质粒复制子和大肠杆菌抗性筛选基因;所述大肠杆菌的质粒复制子为R6K,所述大肠杆菌抗性筛选基因为rpsL基因或pheS基因;所述穿梭载体中不含温敏型复制子和sacB基因。本发明的穿梭载体能够降低对BAC和穿梭载体之间进行同源重组筛选的假阳性率,减少对温度的依赖,提高筛选的准确性和简化流程。不仅可用于大肠杆菌基因组的改造,还可用于在基因组外的遗传物质上引入特定点突变。
一种莱茵衣藻叶绿体-酿酒酵母-大肠杆菌穿梭载体及其构建方法与应用.pdf
本发明提供了一种莱茵衣藻叶绿体‑酿酒酵母‑大肠杆菌穿梭载体及其构建方法与应用。所述构建方法包括穿梭载体的设计、化学合成、组装鉴定以及所述穿梭载体在大肠杆菌中的复制,构建的穿梭载体能够在大肠杆菌、酵母和莱茵衣藻叶绿体之间穿梭并复制。本发明所述穿梭载体中包含酵母的复制元件(CEN)、大肠杆菌的复制元件(ori)、莱茵衣藻叶绿体基因组(SynCpV1.0)。本发明将全化学合成的穿梭载体转化莱茵衣藻细胞,实现穿梭载体的生物学功能,提取叶绿体基因组,转入大肠杆菌并实现穿梭载体在大肠杆菌中的成功复制,首次构建了能够
一种重组杆状病毒载体及其构建方法和应用.pdf
本发明公开了一种重组杆状病毒载体,重组杆状病毒载体包括p10启动子、EGFP核酸序列、pH启动子、Bmp53核酸序列;本发明还提供了该重组杆状病毒载体构建方法及应用。本发明构建的重组杆状病毒载体可以显著提高Bmp53基因在家蚕中的表达量,同时通过将Bmp53基因与绿色荧光基因EGFP基因共表达,使Bmp53基因的表达可视化,便于研究观察。
一种植物重组表达载体及其构建方法和应用.pdf
本发明提供了一种植物重组表达载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。植物重组表达载体pGR20含有耐除草剂基因表达框、抗虫基因表达框和耐逆基因表达框。耐除草剂基因表达框包括CaMV35S启动子、优化密码子的g2m‑epsps基因和CaMVPolyA终止子,抗虫基因表达框包括CaMV35S启动子、优化密码子的cry1C基因和NOS终止子,耐逆基因表达框包括CaMV35S启动子、大豆GmNFYB1基因和NOS终止子。利用这一表达载体可获得耐除草剂抗虫耐逆复合性状的转基因植物,在培育复合性状植物品种中有良
一种新型基因克隆T‑载体及其构建方法和应用.pdf
本发明涉及一种新型基因克隆T‑载体及其构建方法和应用。具体为将两侧含XcmI酶切位点的ccdB基因克隆至pBluescriptII(KS‑),分别获得pLS3417和pLS3424,宿主菌为大肠杆菌DB3.1,XcmI酶切去除ccdB基因后获得T‑载体。T‑载体设计为通过保留T和A两个碱基而保持lacZα读码框结构,以提供α‑互补的功能。TaqDNA聚合酶扩增的PCR产物和T‑载体相连后,转化大肠杆菌DH10B,在含氨苄青霉素、异丙基硫代‑β‑D‑半乳糖苷5‑溴‑4氯‑3‑吲哚‑β‑D‑半乳糖苷的筛选