猪轮状病毒重组腺病毒及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116004550A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202210928343.9A61P31/14(2006.01)(22)申请日2022.08.03C12R1/93(2006.01)(71)申请人石河子大学地址832002新疆维吾尔自治区石河子市北四路221号石河子大学(72)发明人陈创夫吴鹏易继海肖莉(74)专利代理机构北京卓胜佰达知识产权代理有限公司16026专利代理师陈桂兰(51)Int.Cl.C12N7/01(2006.01)C12N15/861(2006.01)C12N15/46(2006.01)C12N15/66(2006.01)A61K39/15(2006.01)权利要求书1页说明书15页序列表（电子公布）附图10页(54)发明名称猪轮状病毒重组腺病毒及其应用(57)摘要本发明属于动物疫苗技术领域，具体涉及一种猪轮状病毒重组腺病毒及其应用。该猪轮状病毒重组腺病毒包括如SequenceNO:1或SequenceNO:2所示的序列。该猪轮状病毒重组腺病毒可以刺激机体在体内产生大量的抗体；从第21天开始，猪轮状病毒重组腺病毒在机体产生的抗体水平显著高于商品化三联疫苗。CN116004550ACN116004550A权利要求书1/1页1.猪轮状病毒重组腺病毒，其特征在于，包括如SequenceNO:1或SequenceNO:2所示的序列。2.根据权利要求1所述的猪轮状病毒重组腺病毒，其特征在于，还包括腺病毒载体。3.根据权利要求2所述的猪轮状病毒重组腺病毒，其特征在于，腺病毒载体为pAdTrack‑CMV。4.组合物，其特征在于，包括权利要求1至3所述的猪轮状病毒重组腺病毒和佐剂。5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于，佐剂选择弗氏佐剂。6.权利要求1至3所述的猪轮状病毒重组腺病毒在制备猪轮状病毒疫苗中的应用。7.SequenceNO:1或SequenceNO:2所示的序列在制备猪轮状病毒重组腺病毒疫苗中的应用。8.权利要求1至3所述的猪轮状病毒重组腺病毒的制备方法，其特征在于，将SequenceNO:1使用用限制性内切酶BglII和XhoI进行酶切，纯化的酶切产物用连接酶进行连接得到猪轮状病毒重组腺病毒；或将SequenceNO:1使用用限制性内切酶EcoRI和HindIII进行酶切，纯化的酶切产物用连接酶进行连接得到猪轮状病毒重组腺病毒。2CN116004550A说明书1/15页猪轮状病毒重组腺病毒及其应用技术领域[0001]本发明属于动物疫苗技术领域，具体涉及一种猪轮状病毒重组腺病毒及其应用。背景技术[0002]猪轮状病毒(PoRV)又称猪轮状病毒性腹泻病，是一种人兽共患病，其感染动物范围广泛，包括各类哺乳动物与禽类。该病是以消化道机能紊乱的一种急性肠道传染性疾病，此病主要危害哺乳仔猪及断奶仔猪，临床上主要以腹泻、脱水、呕吐为主要特征，剖检病变主要集中在消化道，胃肠消化道内含有未消化乳汁或凝乳块。临床上将该病毒分成10个毒株群，其中分布最广泛的是A群，多种动物和人都能够感染，包括猪也易感。另外，猪也可感染B群、C群以及E群。目前在我国生猪养殖群体当中，猪轮状病毒病还没有呈现大规模流行的态势，常常呈地方流行或散发流行。猪轮状病毒一年四季均可发生，但秋天温差大，冬天天气较冷时更容易诱发该病的发生。[0003]目前该病在猪群中感染率较高，直接或间接的影响猪群的生产力，制约了我国养猪业的健康发展，造成巨大的经济损失。至今尚缺乏治疗轮状病毒感染的特效药物，疫苗仍然是预防和控制轮状病毒感染，减少重症死亡病例的最有效途径。国内外普遍使用的常规疫苗主要是强毒灭活苗和弱毒活疫苗。由于选用的毒株不同，加之不同地区自然条件及母乳中可能存在的抗体等因素使活疫苗的有效性受到一定程度影响。因此，现在的疫苗在控制本病的发生与流行中并不十分理想。[0004]综上，一种预防和/或治疗猪轮状病毒的疫苗及其制备是必要的。。发明内容[0005]针对以上问题，本发明目的之一在于提供一种猪轮状病毒重组腺病毒，该猪轮状病毒重组腺病毒可以刺激机体在体内产生大量的抗体。[0006]为了达到上述目的，可以采用以下技术方案：[0007]本发明一方面提供了一种猪轮状病毒重组腺病毒，包括如SequenceNO:1或SequenceNO:2所示的序列。具体地，SequenceNO:1所示的序列是中国流行株G9P的VP4基因序列片段，SequenceNO:2所示的序列是中国流行株G3PI5的VP7基因序列片段。[0008]进一步地，猪轮状病毒重组腺病毒还可以包括腺病毒载体。具体地，腺病毒载体目前是作为疫苗和作为抗原呈递载体的热点，具有转染效率较高、广泛的亲和性、可同时诱导特异性体液免疫和