牛奶过敏原检测板及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN102636650102636650B(45)授权公告日2014.08.13(21)申请号201210079402.6CN102317780A,2012.01.11,摘要，说明书第11到12段，第20到22段.(22)申请日2012.03.23CN1930474A,2007.03.14,摘要.(73)专利权人沃克（天津）生物科技有限公司US2003073249A1,2003.04.17,摘要，说明地址300384天津市南开区华苑产业园区榕书第14到20段.苑路16号鑫茂科技园A座IJ单元6层WO03046563A1,2003.06.05,全文.右侧CN101387643A,2009.03.18,全文.(72)发明人李会强常艳敏李廼昶任杰审查员杨冀川孙辉(74)专利代理机构天津市宗欣专利商标代理有限公司12103代理人董光仁(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/558(2006.01)(56)对比文件CN101358981A,2009.02.04,权利要求1，说明书到，附图.权权利要求书1页利要求书1页说明书5页说明书5页附图1页附图1页(54)发明名称牛奶过敏原检测板及其制备方法(57)摘要本技术发明公开一种牛奶过敏原检测板，属于金免疫层析检测。本发明在PVC垫板上两端分别设置待测样本区和吸附区，而在其间依次设置有分别将酪蛋白，β乳球蛋白，α乳白蛋白标记胶体金，混合制备的胶体金标记抗原，在硝酸纤维素膜上分别包被混合牛奶过敏原的检测区和包被抗-β乳球蛋白抗体的质控区。检测时，标本中含有牛奶特异性抗体，形成免疫复合物则检测区和质控区形成显色线；如标本中不含有牛奶特异性抗体，则检测区不显色，只有质控区一条显色线。这样设计的本发明具有过敏原检测针对性强、操作简单、成本低、敏感度高等优点，防止单类抗体检测的漏诊现象。应用于疑似牛奶过敏患者的快速筛查，特别适合基层医疗单位使用。CN102636650BCN102635BCN102636650B权利要求书1/1页1.一种牛奶过敏原检测板的制备方法，包括矩形PVC垫板（1）上两端分别设置吸水材料的待测样本区（1）和吸附区（8），其特征在于：待测样本区（1）和吸附区（8）中间依次设置有胶体金标记抗原（3），在硝酸纤维素膜（5）上分别包被牛奶中酪蛋白、β乳球蛋白、α乳白蛋白组成牛奶过敏原（4）的检测区T和包被抗-β乳球蛋白抗体（6）的质控区C，其中，在经膜处理液浸泡过的硝酸纤维素膜（5）上，将牛奶过敏原4和抗-β乳球蛋白抗体（6），按照顺序分别点样于规划的检测区T和质控区C,牛奶过敏原（4）的总蛋白浓度和抗-β乳球蛋白抗体（6）总蛋白浓度均为1.8-2.2毫克/毫升，一次点样，每个点样孔0.2毫升，室温温育2小时；蒸馏水及膜处理液冲洗后，用2%聚乙烯醇溶液室温封闭1小时；弃去封闭液，蒸馏水、膜处理液冲洗，干燥后裁剪置于PVC垫板1上；另将酪蛋白，β乳球蛋白，α乳白蛋白分别标记胶体金，混合制备胶体金标记抗原3，并置于PVC垫板1上。2.根据权利要求1所述牛奶过敏原检测板的制备方法，其特征在于：牛奶过敏原4是牛奶中酪蛋白、β乳球蛋白、α乳白蛋白等浓度比例混合后作为已知抗原点样。3.根据权利要求1所述牛奶过敏原检测板的制备方法，其特征在于：胶体金标记抗原3的制备方法是：每50ml胶体金溶液分别加入0.6ml1mg/ml的酪蛋白溶液、0.8ml1mg/ml的β乳球蛋白溶液、0.5ml1mg/ml的α乳白蛋白溶液，搅拌后再分别加入3ml1%聚乙二醇溶液，离心去上清，分别用0.3mg/ml的聚乙二醇溶液悬浮沉淀，离心后，再用同样溶液悬浮，测定A520nm至1.45-1.55，加入终浓度为0.5mg/ml叠氮钠防腐，分别标记后等体积混合，4℃静置保存，备用。2CN102636650B说明书1/5页牛奶过敏原检测板及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及双抗原夹心金免疫层析检测技术，具体是一种牛奶过敏原检测板及其制备方法。背景技术[0002]过敏性疾病是指机体对外界刺激（食物、药物、花粉等）作出错误免疫应答导致各种临床症。免疫应答是抗原活化免疫细胞后产生机体复杂反应过程；引起过敏反应的抗原（蛋白）称之为过敏原。食物过敏性疾病是由于进食某种食物导致过敏性肠胃炎或皮肤症状，有时可导致严重的全身反应-过敏性休克。牛奶是婴幼儿甚至成人的重要营养来源，而对牛奶过敏的患者饮用牛奶会产生肠胃不适症状，影响儿童健康发育。牛奶过敏在食物过敏人群中占有相当大的比例，成人约占2%，儿童约占6%。研究证实，食物过敏患者的临床症状是因患者体内产生的特异性抗体（IgE或IgG）所致；同时也可以通过检