一种人脐带间充质干细胞的分离和培养方法.pdf
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一种人脐带间充质干细胞的分离和培养方法.pdf
本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的分离和培养方法,该分离和培养方法包括以下步骤:新生儿新鲜的离体脐带→低温PBS液保存、冲洗→低温浸泡液中剪切→低温PBS液冲洗,低温真空处理→解冻→加入PBS液浸润→加入第一混合酶溶液,振荡酶解处理→加入第二混合酶溶液,振荡酶解处理→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,静置后离心,弃上清→加入PBS液,静置后离心,弃上清→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,静置后离心,弃上清→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,混匀→扩增培养;具有提高脐带
脐带间充质干细胞分离培养方法.pdf
本发明公开了脐带间充质干细胞分离培养方法。本发明所要保护的一个技术方案是培养间充质干细胞的组合物。所述组合物由胎牛血清、表皮生长因子和DMEM/F12培养基组成。所述DMEM/F12培养基由L‑谷氨酰胺、MEMNEAA和DMEM/F12基础培养基组成。实验证明使用本发明培养间充质干细胞的组合物分离培养人脐带间充质干细胞并在500g离心力条件下离心收集得到的人脐带间充质干细胞的细胞活率和扩增倍数均增强,细胞回收率也显著提高,并具有较强的成骨成软骨分化的能力,可应用于制备开发治疗骨关节炎相关的药物。
一种人脐带间充质干细胞的分离方法.pdf
本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的分离方法,该分离方法包括以下步骤:新生儿新鲜的离体脐带→低温PBS液保存、冲洗→低温浸泡液中剪切→低温PBS液冲洗,低温真空处理→解冻→加入PBS液浸润→加入第一混合酶溶液,振荡酶解处理→加入第二混合酶溶液,振荡酶解处理→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,静置后离心,弃上清→加入PBS液,静置后离心,弃上清→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,静置后离心,弃上清→加入胎牛血清、PBS液、LG‑DMEM培养基,混匀,即得;具有提高产品品质的效果。
人脐带间充质干细胞的提取和培养方法.pdf
本发明公开了一种人脐带间充质干细胞的提取和培养方法。脐带组织切碎后经I型胶原酶消化后移入含培养基的培养瓶中持续培养。所用培养基为低糖DMEM基础培养基并且添加了胎牛血清、成纤维生长因子、上皮细胞生长因子、细胞转录因子、胆固醇。使用本发明的提取和培养方法可以长期培养人的脐带间充质干细胞,并且维持干细胞活性。本发明解决了目前人脐带间充质干细胞培养中细胞衰老过快以及分化问题,能够长期获得具有干细胞特性的人脐带间充质干细胞。
一种脐带间充质干细胞的分离培养方法.pdf
本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离培养方法,包括以下步骤:S1、采集脐带,剔除血管后清洗干净,获得脐带基质;S2、将脐带基质剪成小块,加入胶原蛋白酶液消化15‑20min,然后终止消化;S3、离心,弃去上清液,向残留的组织块中加入组织块处理液,处理3‑5min后再次离心,弃去上清液,获得待培养组织块;S4、将待培养组织块进行接种培养,待细胞达到80‑90%融合度时去除组织块,消化、传代,得到脐带间充质干细胞。本发明既能缩短脐带间充质干细胞的提取时间,又能减少细胞的老化、损伤,使获得的细胞具有较高的增殖