一种检测植物中酰脲含量和尿囊酸含量的试剂盒及其方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114235522A(43)申请公布日2022.03.25(21)申请号202111489116.2(22)申请日2021.12.08(71)申请人中国科学院东北地理与农业生态研究所地址150000黑龙江省哈尔滨市南岗区哈平路138号(72)发明人严君邹狮韩晓增邹文秀陆欣春陈旭(74)专利代理机构哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙)23210代理人何强(51)Int.Cl.G01N1/28(2006.01)G01N1/44(2006.01)G01N21/31(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图4页(54)发明名称一种检测植物中酰脲含量和尿囊酸含量的试剂盒及其方法(57)摘要一种检测植物中酰脲含量和尿囊酸含量试剂盒及其应用，解决了现有检测植物中酰脲和尿囊酸的方法步骤繁杂、检测结果误差大的问题。检测植物中酰脲含量的试剂盒由提取液、水解液A、水解液B、反应试剂A、反应试剂B、反应试剂C、标准品和反应板组成。方法：利用所述的酰脲含量的试剂盒进行检测。检测植物中尿囊酸含量试剂盒由提取液、水解液C、反应试剂A、反应试剂B、反应试剂C、标准品和反应板组成；方法：利用所述的尿囊酸含量的试剂盒进行检测。本发明使用反应板使得本发明的检测更加便捷，时间上能达成一致，重复性好，准确度高，从而高效地测定植物体内酰脲、尿囊酸含量，解决了现有方法中存在的步骤繁杂、检测结果误差大的问题。CN114235522ACN114235522A权利要求书1/2页1.一种检测植物中酰脲含量的试剂盒，其特征在于检测植物中酰脲含量的试剂盒由提取液、水解液A、水解液B、反应试剂A、反应试剂B、反应试剂C、标准品和反应板组成，其中所述提取液是pH＝7、0.1mol/L的磷酸缓冲液、水解液A是浓度为0.75mol/L的盐酸溶液，水解液B是浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液，反应试剂A是盐酸苯肼粉剂，反应试剂B是浓度为20g/L铁氰化钾溶液，反应试剂C是质量分数为36％浓盐酸，标准品是1mmol/L尿囊素标准液，反应板是连排管带盖的反应板。2.根据权利要求1所述的一种检测植物中酰脲含量的试剂盒，其特征在于反应板是8*12*2ml连排管带盖的反应板。3.权利要求1所述的试剂盒检测酰脲含量的方法，特征在于试剂盒检测酰脲含量的方法：将待测样品按重量份数比为1:10～20的比例与权利要求1所述试剂盒中的提取液混合，于100℃水浴中萃取5min，以4000rpm/min离心15min，去沉淀留上清液，获得含有酰脲提取液；取含有酰脲提取液置于反应板中，加入水解液A，于100℃水浴萃取7min，冷却室温后，再加入水解液B，于100℃水浴萃取7min，然后加入由反应试剂A配置的浓度为5g/L的反应试剂A溶液，沸水浴2min，冷却室温后于冰水浴上反应30min，再加入反应试剂B，摇匀后加入反应试剂C，于冰水浴上反应30min，获得酰脲测定液；对照组不加热，且水解液A与水解液B用蒸馏水代替；将所述测定液在波长535nm处，读取吸光度值OD，根据以下公式计算样品中酰脲的含量：△A1为酰脲测定管吸光值与对照管吸光值差值再带入标准曲线中计算出酰脲的含量，V1为总水解体积，Vt1为分取倍数，W为植物干重；其中，检测方法中，标准曲线的绘制如下：取尿囊素标准样品1mmol/L母液，依次稀释成0umol/L、0.025umol/L、0.05umol/L、0.1umol/L、0.25umol/L的溶液，测定方法与酰脲测定方法一致，上机测定，读取吸光值，并绘制标准曲线。4.一种检测植物中尿囊酸含量的试剂盒，其特征在于检测植物中尿囊酸含量试剂盒由提取液、水解液C、反应试剂A、反应试剂B、反应试剂C、标准品和反应板组成；所述提取液是pH＝7、0.1mol/L的磷酸缓冲液，水解液C是浓度为0.25mol/L的盐酸溶液，反应试剂A是盐酸苯肼粉剂，反应试剂B是浓度为20g/L铁氰化钾溶液，反应试剂C是质量分数为36％的浓盐酸，标准品是1mmol/L尿囊素标准液，反应板是连排管带盖的反应板。5.根据权利要求4所述的一种检测植物中尿囊酸含量的试剂盒，其特征在于反应板是8*12*2ml连排管带盖的反应板。6.权利要求4所述的试剂盒检测尿囊酸含量的方法，其特征在于试剂盒检测尿囊酸含量的方法：将待测样品按照重量份数比为1:10～20的比例与权利要求4所述试剂盒中的提取液混合，于100℃水浴中萃取5min，以4000rpm/min离心15min，去沉淀留上清液，获得含有尿囊酸提取液；含有尿囊酸提取液置于反应板中，加入水解液C，于100℃水浴萃取7min，冷却室温后，再加入由反应试剂A配置的浓度为5g/L的反应试剂A溶液，于冰水浴上反应30min，然